人源抗狂犬病毒特免血浆筛查方法的建立(2)

2014-07-07 01:15

导读：1.1.3 人用狂犬病疫苗和工作对照品人用浓缩狂犬病疫苗（≥2.5 IU/瓶），批号20040401、20040403、20041101。工作对照品（HRIG）批号9008。以上制品均由兰州生物

　　1.1.3 人用狂犬病疫苗和工作对照品

　　人用浓缩狂犬病疫苗（≥2.5 IU/瓶），批号20040401、20040403、20041101。工作对照品（HRIG）批号9008。以上制品均由兰州生物制品研究所生产。

　　1.1.4 实验样本

　　狂犬病毒抗体阳性血浆20份（SNT效价≥10 IU/ml），阴性血浆100份，均由兰州生物制品研究所血液制剂室提供。

　　1.2 方法

　　首先对供浆者进行0、3、7、14、28日程序狂犬疫苗注射，于最后一针1个月后采集血样，用ELISA试剂盒检测其相对效价，将此血样与标准品进行系列稀释，分别与狂犬病毒悬液结合，小鼠脑内注射，在规定的时间内，观察小鼠存活和死亡情况，测定出供试品效价，之后再用小鼠中和法试验SNT效价进行比较。将中和法测得SNT效价结果≥10 IU/ml的样品，再用其他三家ELISA［4］试剂盒进行检测。最终筛选出与小鼠中和法试验结果相接近的试剂盒作为大规模筛查狂犬病抗体阳性血浆初筛试剂盒，设计出能满足单采浆站特异性免疫血浆筛选的需要和可靠的收浆方案。

　　2 结果

　　2.1 初免后两种检测方法的比较

　　按0、3、7、14、28日程序免疫后1个月采集的血样用两种方法检测的结果比较，见表1。表1 初免后两种检测方法的比较（略）注：兰生所试剂（批号为20040703）

　　从表1可以看出，小鼠中和法与A厂家ELISA试剂盒检测结果存在很大差异，从而导致了大量的特免血浆漏检。