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35 表皮生长因子受体(EGF)和Ⅰ型PKA之间的交互作用 生长因子调节正常的细胞增殖和分化，但在细胞瘤性转化的过程中同样发挥重要作用。众多内源性生长因子中，TGFα、AR和CRIPTO是重要的EGF相关蛋白，参与一些上皮性癌的病理发生过程。在大多数乳腺癌、结肠癌细胞系中都可以检测到TGFα、AR和CRIPTO的过度表达。通过特异性RNA和DNA反义方法抑制这些基因的表达可以抑制结肠和乳腺癌细胞的生长。
有学者证实PKAⅠ表达与TGFα和ras依赖性转化机制有关。TGFα和ras转化可引起R1α和PKAⅠ的过度表达。而PKAⅠ的选择性抑制剂8C1cAMP可使TGFα和ras的表达下降。在MDAMB468人乳腺癌细胞系中，反义EGFR质粒向量抑制EGFRⅠ生成可特异性下调PKAI蛋白的表达。因此对EGFR和PKAⅠ进行联合抑制(抗EGFR Mab c225和8C1cAMP)可产生协同的抗瘤细胞增生效应。
36 R1α和RⅡβ蛋白在癌细胞中的表达呈负相关而且作用相反 Maria研究发现[6]反义寡核苷酸抑制R1α的表达可使癌细胞中RⅡβ的水平增高，但没有提高RⅡβ的合成速度和RⅡβ mRNA的水平。脉冲示踪实验证实，经过反义处理的结肠和肾上腺癌细胞，其RⅡβ蛋白的半衰期增加3~6倍，而R1α蛋白的半衰期无异常改变。
PKARⅡ在正常非增生性组织和生长阻滞细胞中过度表达，而在肿瘤细胞和生长旺盛的组织中可以检测到PKARⅠ的高表达。在乳腺癌细胞系中RⅠ∶RⅡ比值明显升高，而且PKARⅠ的表达水平和乳腺癌的预后密切相关：表达越高，肿瘤预后越差。但过度表达的PKARⅡ可诱导癌细胞系出现生长抑制，并可使已出现ras转化的小鼠成纤维细胞的转化表型恢复正常。这提示我们PKARⅠ和PKARⅡ蛋白在控制肿瘤生长和分化过程中发挥着不同的作用。
37 cAMP反应元件结合蛋白(CREB)转录因子家族成员与内分泌性肿瘤的发生有关 有学者研究发现[7]CREB结合cAMP反应元件，其丝氨酸(133)被PKA磷酸化后可以激活转录。CREB转录因子家族包括CREB、CREM和ATF1。转基因鼠中CREB负性突变体的靶向表达可导致促生长激素分泌细胞和甲状腺发育不全。生长激素分泌性腺癌中，GαS蛋白质(GSP)突变体的表达率为40%，而CREB通常表现为过表达和高度磷酸化。CREM的同工型ICER被PKA激活后，在GSP定位的肿瘤中表达增高。研究肾上腺癌细胞系H295R，发现CREB的表达降低而CREM表达代偿性升高。CREB转录因子家族在内分泌组织的分化和增生过程中发挥重要作用，内分泌性肿瘤中都可能检测到CREB转录因子家族成员不同程度的表达。
4 蛋白激酶A在肿瘤治疗方面取得的进展
41 PKA的反义寡核苷酸抑制 反义寡核苷酸是一种经过修饰的短链DNA或RNA分子，可以与互补的信使RNA杂交从而抑制蛋白质的特异性表达。cDNA微排研究表明PKAR1α反义寡核苷酸可导致多位点基因组修饰，PKAR1α基因的反义缺失可以调节除cAMP以外的多条信号传导途径[8]。近年来，反义寡核苷酸治疗已成为最有前途的基因治疗方法，特别是在肿瘤治疗方面。
411 同时抑制Bcl1、Bclxl、表皮生长因子受体(EGFR)和PKA1可以产生抑制肿瘤、促进凋亡和抗血管形成的效应：Tortota等[9]证实PKA1和激活状态下的EGFR存在功能和结构上的交互作用。PKA1的一些选择性抑制剂包括8C1cAMP和混合主链DNA/RNA反义寡核苷酸(MBOASPKA1)，EGFR的抑制剂包括Mabc225和ZD1839等。联合阻滞EGFR和PKAⅠ可以产生协同的抗肿瘤效应。EGFR和PKAⅠ的抑制剂还可以和细胞毒物质联合应用增加抗癌效果，抑制生长因子和血管生成因子的表述。另外PKA1和Bcl2介导的凋亡途径有关。ASPKA1和ASBc12联合应用可以产生抗肿瘤和抑制凋亡的协同效应。ASPKA1在口服给药的情况下仍具有抗肿瘤和抗血管形成的效应，ZD1839协同给药可增强其抗癌效果。
Bcl2和Bclxl是一类重要的蛋白质家族，抑制凋亡过程并且抵抗化疗和放疗。它们的反义寡核苷酸4625和4626与化疗药物联合应用可以特异性抑制肿瘤的生长，目前已经进入Ⅲ期临床阶段[10，11]。GEM321为二代PKAR1α反义寡核苷酸，单独应用或与化疗药物联合用药可以产生显著的抗肿瘤效应，现已进入Ⅱ期临床阶段。EGFR是有丝分裂信号传导的主要换能器，参与细胞的增殖和血管的发生，与肿瘤的病理发生、演进和预后关系密切[12]。ZD1839是一种选择性EGFR酪氨酸激酶抑制剂，可以阻滞上述信号传导途径从而达到抗肿瘤的目的[13，14]。Tortota等以GEO结肠癌和ZR751乳腺癌细胞系为研究对象，发现三种物质联合应用可以产生显著的抑制增生、促进凋亡和抗血管形成效应[15]。说明酪氨酸激酶受体EGFR、信号传导激酶PKA和抗凋亡蛋白Bcl2之间存在功能上的交互作用。
412 PKAR1α反义寡核苷酸与羟喜树碱联合应用可以抑制肿瘤生长：GEM321为二代PKAR1α反义寡核苷酸，作用于PKAR1α调节亚单位的813密码子，其5’和3’端包括四个2’0甲基寡核苷酸。羟喜树碱是一种拓扑异构酶抑制剂，和喜树碱相比其活性更高而毒性较低。有学者研究证实[16]羟喜树碱可以增强GEM231的抗肿瘤活性。而这种作用与羟喜树碱的剂量呈正相关。
413 选择性细胞色素C氧化酶抑制剂和EGFR抑制剂、反义PKA寡核苷酸联合应用能抑制肿瘤的增长和血管发生：Khew Voon Chin通过对酵母菌的研究发现,细胞色素C氧化酶(COX)亚单位Vd和R1α之间有交互作用，并且cAMP可调节COX的活性。细胞色素C氧化酶2(COX2)可以促进癌细胞增生和血管发生，EGFR的激活诱导COX2的表达并通过cAMP和PKA调节其活性。COX2的抑制剂SC236、EGFR酪氨酸激酶抑制剂ZD1839和DNA/RNA混合主链寡核苷酸ASPKA1联合应用能起到显著的抑制肿瘤增生的效果，并完全抑制血管内皮生长因子VEGF的表达[17]。
42 1,25二羟维生素D3[1，25(OH)2VD3]通过下调PKA活性、增加细胞骨架结构来抑制肿瘤的侵袭和转移：Lewis肺癌细胞系(LLCLN7)侵袭再构成基底膜被覆滤膜的能力可被1，25(OH)2VD3所抑制。经1，25(OH)2VD3处理的细胞基PKA活性下降，同时多聚肌动蛋白水平升高，而后者被认为可以抑制肿瘤的侵袭。实验证明1，25(OH)2VD3可以抑制PKA的表达，PKA活性下降可能作为1，25(OH)2VD3影响细胞骨架结构，抑制肿瘤侵袭的中间信号。
综上所述，cAMP依赖性PKA是cAMP发挥作用的主要调节子。PKA和cAMP活化后，在ATP的存在下调节细胞的物质代谢和基因表达，并影响细胞的增殖和分化。近年来，关于PKA特别PKAR1α在肿瘤方面研究较多，特异性抑制PKAR1α的表达可以产生显著的抑制肿瘤增生效应，对PKAR1α的反义寡核苷酸抑制已经成为近年来肿瘤治疗的热点之一。