仓鼠胰腺癌原位模型的建立及生物学特性(2)
2013-06-11 01:06
导读:1.2.2仓鼠胰腺癌原位模型的建立PGHAM1细胞株于DMEM培养液中稳定传代5~6代. 观察细胞增殖旺盛时终止培养,用无血清DMEM培养液制备细胞悬液,调整细胞密度至
1.2.2仓鼠胰腺癌原位模型的建立PGHAM1细胞株于DMEM培养液中稳定传代5~6代. 观察细胞增殖旺盛时终止培养,用无血清DMEM培养液制备细胞悬液,调整细胞密度至1×1010/L,备用. 以60 mg/kg腹腔注射戊巴比妥钠,取腹部正中切口,牵出胰腺,于脾门较宽大处胰腺背膜下注射1×106/L PGHAM1细胞悬液后常规关腹. 于术后7, 14, 21, 28 d分别剖杀10只. 切除原位肿瘤,用测径器测量肿瘤大小,按公式V=π/6×长×宽×高计算肿瘤体积,同时观察腹水的质与量、有无淋巴结、大网膜、壁层腹膜及肝脏转移.
1.2.3病理学检查切除大网膜,平铺在蜡片上,“卷席法”处理大网膜标本;40/L甲醛固定原位肿瘤、壁层腹膜、肝脏及可疑淋巴结,石蜡包埋切片,HE染色,光学显微镜观察.
2结果
2.1原位肿瘤及转移情况接种后第7日,可见胰内原发灶大小(16±6) mm3,