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放射性碘标记羟氨苄青霉素用于青霉素结合蛋白(2)

2013-09-03 01:04
导读:讨论 由于青霉素G与所有青霉素结合蛋白都具有良好的结合,所以,目前大家都采用其标记物作为研究工具。,4C一PenieillinG(PCG)是目前应用最为广泛的标记

  讨论

  由于青霉素G与所有青霉素结合蛋白都具有良好的结合,所以,目前大家都采用其标记物作为研究工具。,4C一PenieillinG(PCG)是目前应用最为广泛的标记品,但此标记品的比放低(1.45~2.22火10一SBq/mol),这就造成了标记品用量大且曝光时间太长,既使在使用荧光闪烁法(Flurograp-hy)、预曝光(Prefog义ing)和超低温(一700C)条件下曝光等这些快速自显影方法,仍需要20一,60天(9-11)。采用氛标记法提高比放,由于庄内酞胺环的不稳定性,幅射  自分解快,所以不能作为商品出售。现在必须进口,价格昂贵。

  用标记多肤类激素和蛋白质已有大量的资料报道,但用于标记冬内酞胺类抗生素的却很少。由于许多压内酞胺类抗生素具有类似酪氨酸残基的结构成分对位经基使苯环上的氢原子活跃易被取代(如经氨节青霉素),使放射性碘标记能够进行。而青霉素G苯环的结构特性则不适用于放射性碘标记。

  我们制备的一经氨节青霉素,由于其比放射性高(约Bq/mol),即使不使用荧光闪烁法和预曝光,自显影亦缩至1周左右,大大加快了整个实验周期。整个标记过程简便易行,重复性好,标记完后不需要特殊分离手段(电泳过程中自动分离)。更为重要的是解决了标记品的供给,为整个实验节约大量经费,并为其研究在国内提供了一个新的技术方法。

参考文献

(1)Spratt BG et ale  Eur J Biochem 1977. 72; 341-352

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(11)Laskey RA. et ale  Eur J Biochem 1975: 56: 335-341

   [2] 

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