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取无菌小试管13支排于试管架,于第1管加入液体培养基1.8 mL,2~12管各加1 mL。将02 mL的药物原液加入第1管中,混合后吸出1 mL加入第2管中,用同法依次2倍稀释第2管、第3管……至第12管,从第12管吸1 mL加入到第13管,第13管为样本对照,则各管的浓度依次为128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25、0.125、0.06 μg/mL。将1~12管中加入已校正浓度的菌液005 mL(105 cfu/mL),混匀,13管不加菌液。取3只试管只加入肉汤1.0 mL,做为空白对照;取3只试管加入肉汤1.0 mL和菌液0.05 mL,做为菌液对照。混匀后试管加硅胶塞塞好,放置37 ℃培养18 h,观察结果,以无细菌生长的最低浓度为最低抑菌浓度(MIC)。同法操作受试化合物,阳性对照EMA、AZA。
2结果
受试化合物和阳性对照EMA、AZA的最低抑菌浓度(MIC)见表1,两化合物对金葡菌ATCC25923、肺炎链球菌ATCC49619、大肠杆菌ATCC25922、金葡菌8195、肺炎链球菌8220无显著抗菌活性,对流感杆菌8227只有较弱的抑制作用。表1化合物Ⅰ和Ⅱ对病原菌的抑制活性筛选结果
3讨论
本研究结果表明,2个丁酸衍生物葡萄糖苷对所选6种病原菌的抑制活性不显著。虽然kinsenoside为金线莲药材的主要成分,含量很高,药材具有清热凉血、泻火解毒、消炎止痛功效,但其相关的物质基础还有待进一步深入研究,或者制备此类丁酸衍生物葡萄糖苷的一系列衍生物,以后再进行活性筛选。
在所测试的2个丁酸衍生物葡萄糖苷中,kinsenoside为含有一个手性中心的丁内酯的吡喃葡萄糖苷,药理活性显著,它的独特结构已经引起国内外研究者的广泛关注[6-9]。本研究将化学与药理方面有机结合,在对该化合物进行降血糖[6]、抗癌、抑制蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)等活性测试的同时,也测试了金线莲中富含的主要成分kinsenoside[8]体外抑菌的药理活性,为全面评价活性化合物kinsenoside的药理活性提供了科学依据,也为该化合物及药材的药用价值开发奠定了基础。
【参考文献】 (转载自http://zw.NSEaC.com科教作文网)
[1] 福建中医药研究所.福建药物志:第二册[M].福州:福建科技出版社,1982:215.
[2] 何春年,王春兰,郭顺星,等. 福建金线莲的化学成分研究[J].中国药学杂志,2005,40 (8):581-583.
[3] 何春年,王春兰,郭顺星,等. 福建金线莲的化学成分研究Ⅱ[J].中国中药杂志,2005,30 (10):761-763