有关药用植物代谢组学的研究进展论文(2)
2013-11-11 01:11
导读：图2代谢组学研究技术步骤 略 1.4分离和定量 分离是代谢组学研究中的重要步骤，与质谱联用的色谱和电泳分析技术都是使用紫外或电化学检测的方法进行
图2代谢组学研究技术步骤 略
1.4分离和定量
分离是代谢组学研究中的重要步骤，与质谱联用的色谱和电泳分析技术都是使用紫外或电化学检测的方法进行定量，其对代谢组数据的分辨率与定量能力都有一定的影响。Tomita M等［11］总结了各种色谱分离法中经常遇到的技术问题，认为毛细管电泳和气相色谱法由于具有较高的分辨率，已成为代谢组学研究的常规技术手段之一，液相色谱因其适用范围广，应用也相当广泛。
Tanaka N等［12］用高效液相色谱对样品进行分离，认为使用硅胶基质填充毛细管整体柱的高效液相色谱系统具有用量少、灵敏性高、低压降高速分离等优势；同时，Tolstikov V等［13］也使用硅胶填充的毛细管液相色谱方法对聚戊烯醇类异构体进行了有效分离，获得了很好的分辨率。Tanaka N等［14］发现二维毛细管液相色谱法的分辨率比传统的高效液相法高10倍。相对于其他色谱方法而言，超临界流体色谱（SFC）是分离疏水代谢物最具潜力的技术之一，特别适用于分离那些传统HPLC难以分析的疏水聚合物，Bamba T等［15］通过SFC对聚戊烯醇进行分析，证明其具有较好的分离能力。针对质谱中存在的共洗脱现象，Halket JM等［16］发明了一种适用于GC睲S的反褶积系统，对共洗脱的代谢产物进行分离与识别。Aharoni A等［17］使用傅立叶变换离子回旋共振质谱（FT睮CR睲S）对非目标代谢物进行分析，快速扫描植物突变样品，获得了一定量的代谢成分。
与分离一样，定量能力也是代谢组学研究中的重要因素，其取决于各分析系统的线性范围。傅立叶转换核磁共振（FT睳MR)、傅立叶红外光谱（FT睮R）以及近场红外光谱法（NIR）等技术由于敏感性低，重复性受共洗脱现象影响较小也被用于检测中。近年来，FT睳MR技术常被用于植物代谢组的指纹图谱研究 ［18］，但由于NMR分析需要样品量较大，分析结果易受污染，Griffin J L ［19］发现将统计模式识别与FT睳MR相结合可以对代谢物进行全面分析。除FT睳MR之外，FT睮R通过对有机成分的结构进行常规光谱测定，也可适用于代谢组学的研究，特别是应用于构建代谢组学的指纹
