大鼠弥漫性脑损伤后Homer蛋白的表达及其意义(2)
2014-07-31 01:00
导读:1.2.2取材各组大鼠至预定时间后,常规麻醉,断头取脑,选取额顶叶皮层及海马区神经组织混合多去污剂裂解缓冲液于裂解器内裂解匀浆,匀浆液高速离心
1.2.2取材各组大鼠至预定时间后,常规麻醉,断头取脑,选取额顶叶皮层及海马区神经组织混合多去污剂裂解缓冲液于裂解器内裂解匀浆,匀浆液高速离心(15000 g, 15 min)后取上清液冷冻保存.
1.2.3免疫印迹技术检测待样本制备完成后,分别行各亚型Homer蛋白免疫印迹技术检测,BCIP/NBT显色.
2结果
Homer1a及Homer1b/c蛋白阳性表达可见于额顶叶皮层及海马区神经组织,其中Homer1a分子于脑损伤后0.5 h起出现,持续至伤后168 h,正常组及假手术组均未见阳性表达;而Homer1b/c分子在正常组、假手术组及机械损伤组均可见阳性表达,在神经组织内的分布与Homer1a基本相同. Homer2a/b及Homer3分子的阳性表达主要见于海马区神经组织,而额顶叶皮层组织仅有微量表达(Fig 1).
3讨论
近年来,不同的Homer基因剪切变异型不断被发现,到目前为止共有10余种,但从总体上可将其分为2大类,即短Homer和长Homer[2]. Homer1a蛋白的表达受神经元兴奋性活动的调节,癫痫、高频刺激、光刺激及发育过程中海