探讨楮实提取物的体外抗氧化活性论文(2)
2014-08-11 01:07
导读：1.4.2 清除DPPH·自由基〔8〕 DPPH·自由基是一种稳定的自由基，在有机溶剂中呈紫色，在517 nm波长有较大吸收，当加入抗氧化剂一部分自由基被清除，使得在
1.4.2 清除DPPH·自由基〔8〕
DPPH·自由基是一种稳定的自由基，在有机溶剂中呈紫色，在517 nm波长有较大吸收，当加入抗氧化剂一部分自由基被清除，使得在该波长下吸收减弱，可借此来评价物质的抗氧化活性。取各萃取物50 mg，用无水乙醇溶解并定容至25 ml；取粗多糖50 mg，用蒸馏水溶解并定容至25 ml，配制得2 mg/ml的各样品质量浓度，再以该质量浓度配制成所需浓度；以无水乙醇配制0.16 mmol/L DPPH·溶液，避光保存。取3 ml待测样品溶液加入3 ml DPPH·溶液于25℃水浴中加热15 min，在517 nm测得试样吸光度（Ai）。取3 ml蒸馏水代替样品测得空白吸光度（A0）。向3 ml样品中加入3 ml蒸馏水测得样品本底吸光度（Aj），每个质量浓度样品做3个平行，取平均值。以Vc作阳性对照，按下式计算清除率：K(%)=〔A0-(Ai-Aj)〕/A0×100。
1.4.3 Fe3 还原能力测定〔9〕
取2.5 ml不同质量浓度的样品乙醇溶液，加入0.2 mol/L磷酸缓冲液2.5 ml及1%铁氰化钾2.5 ml，50℃水浴反应20 min后急速冷却，加入10%三氟乙酸溶液2.5 ml混匀，4 000 r/min离心10 min，取上清液5 ml，加入4 ml蒸馏水及0.1% FeCl3 1 ml，10 min后于700 nm处测定吸光值。以Vc作为阳性对照。
2 结 果
2.1 对·OH自由基的清除作用
由图1可以看出，大部分提取物对·OH自由基都表现出一定程度的清除能力，并在实验浓度范围内呈明显的量效关系，但各部分提取物的清除能力都弱于Vc。清除能力大小依次为总醇提取物＞氯仿提取物＞正丁醇提取物＞粗多糖＞水层＞乙酸乙酯提取物。考虑到样品本底吸收的影响，本实验样品最高浓度为1 mg/ml，未测定更高浓度样品的清除作用。石油醚提取部分效果不明显，故未对其进行比较分析。
楮实提取物对·OH自由基清除活性的半清除率浓度（IC50，mg/ml）值顺序为：Vc(0.06)＜总醇提取物(0.28)＜氯仿提取物(0.31)＜正丁醇提取物(0.41)＜粗多糖(0.74)＜水层部分(1.01)＜乙酸乙酯提取物（12.44）。半清除率浓度与清除能力大小成负相关，即半清除率浓度越小则清除能力越强，除乙酸乙酯提取物外，醇提物的各提取部分的半清除率浓度随着提取溶剂极性增大而
