RP睭PLC法测定钩藤煎剂中钩藤碱含量及变化(2)

　　A钩藤碱对照品 B钩藤样品1钩藤碱

　　图1 色谱图3.4 精密度试验 精密吸取钩藤碱对照品溶液20μl，连续进样6次，测定峰面积，计算RSD为1.12%。

　　3.5 稳定性试验 取同一份供试品溶液分别在0h、2h、4h、6h、8h、16h，测定钩藤碱峰面积，计算RSD为2.78%，表明供试品溶液在16h内稳定。

　　3.6 重复性试验 称取同一批号(200804)钩藤药材15g6份，在同一温度、加水量及煎药法下，取样处理后，测定钩藤碱峰面积积分值，RSD为2.18%。

　　3.7 样品含量测定 精密吸取各时间段提取的供试品溶液20μl进样，记录色谱图(见图1)，根据峰面积计算各供试品中钩藤碱含量，以煎药时间为横坐标，样品中钩藤碱溶出量为纵坐标，绘制趋势图(见图2)，以趋势图为基准，采用二次曲线拟合法求得被测溶液中钩藤碱随时间变化方程：y=-0.0079t2+0.1796t+0.3678，微分得dy/dt=-0.0158t+0.1796。当dy/dt=0时，t=11.4。由此得知，在汤药中钩藤碱含量在11.4min达到高峰，其后在汤药中的钩藤碱含量逐渐下降。

　　图2 钩藤碱含量随煎煮时间的变化规律

4 讨论

　　4.1 实验中曾考察了甲醇∶水=90∶10、80∶20、65∶35等多种流动相比例，钩藤碱分离效果均不理想或者出峰时间较晚，所需分析时间过长。当采用甲醇∶水=70∶30的比例的时，钩藤碱峰形对称,分离度较理想，被测组份保留时间适中。

　　4.2 由RP睭PLC分析得知，钩藤在沸水后下煎煮过程中，(1)在汤药中的钩藤碱含量在11.4min达到高峰。(2)煎煮时间在10min时，其钩藤碱的含量达到90%。(3)煎煮时间在13min时，在汤药中钩藤碱含量下降了10%，煎药时间至25min后，汤药中的钩藤碱的含量降至高峰时的50%以下。由以上分析得知钩藤在沸水后下煎煮法中，其煎煮时间最好控制在10min～13min，该煎药时间段内汤药中的有效成份含量会相对较高。以上结果对临床科学合理煎药具有一定指导意义。

【参考文献】