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两种富集培养基富集培养结果见图3~图5。由图可见:海滩污水样品中光合细菌使用改良富集培养基12 d培养液转红色(OD660=0.321),而原富集培养基富集培养液转红色(OD660=0.329)在第18 d出现;鸭塘污水中光合细菌使用改良培养基富集11 d培养液转红色(OD660=0.326),而原富集培养基富集培养液转红色(OD660=0.329)则在第16 d出现;奶牛场污水中光合细菌使用改良培养基富集11d培养液转红色(OD660=0.339),而原富集培养基培养液转红色(OD660=0.339)则在第16 d出现。使用改良培养基从3个地点(海滩、奶牛场、鸭塘)样品中富集光合细菌比原培养基提前5~6 d。
3 讨论
NaHCO3在富集光合细菌过程中有很大的作用。①用于调整培养液的pH。对于异养型光合细菌,一般使用5%的NaHCO3把pH调节到7.0~8.0。②NaHCO3产生的CO2在细菌营养代谢中具有重要作用。首先,CO2能与有机酸结合,生成多羧基酸,在三羧酸循环中起重要作用[4]。其次,CO2能促进荚膜细菌荚膜的形成,推测其可促进荚膜红假单胞菌的增殖[5]。③富集培养相对于分离培养所用的时间较长,加大作为碳源的碳酸氢钠的用量能延续增长光合细菌的数量,这点对于第一次富集培养尤为重要;但是NaHCO3不能加得过多,这是因为NaHCO3会导致培养液碱化而不利于光合细菌的生长;NaHCO3是富集螺旋藻等其他藻类的主要营养成分。加量过多,促进藻类繁殖,光合细菌富集会受到影响。
酵母膏对光合细菌的生长有明显的刺激作用。这主要是由于酵母膏的营养丰富,含有光合细菌所需要的各种生长因子。酵母膏浓度在0.25%以内对菌体繁殖速度有很大的影响,但浓度过高,容易染菌,不利于分离[6]。
光合细菌是国内外致力于开发的微生物资源,在水产养殖业中具有去除NH4+和NO2-,改善水质,提高鱼饲料营养,促进鱼、虾生长发育的功效。光合细菌的推广应用需要合适的培养基质,本试验根据细菌的生长速度和产量来看,改良培养基效果良好。但能否是最佳方案,还需进一步研究。
参考文献:
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[2] 钱存柔,黄仪秀.微生物学实验教程[M].北京:北京大学出版社, 2001.212.
[3] 杜荣骞.生物学[M].北京:高等出版社,1985.476.
[4] 陈天寿.微生物的培养基的制造与应用[M].北京:中国出版社,1995.21.
[5] http://content.edu.tw/junior/bio/tc_wc/textbook
[6] 郭庆文,吉海平.紫色非硫光合细菌的研究[J].饲料工业,1994 ,15 (3):36-39.