浅谈马铃薯脱毒苗快繁生产管理技术(2)

　　3快繁瓶装苗的控制

　　在快繁脱毒苗时，瓶中如少放脱毒苗，其长得快，脱毒苗节间长、叶大且须根发达；如放多脱毒苗，其长得慢，脱毒苗弱、叶小且挨瓶的苗腐烂。这2种情况对快繁都不利，故快繁苗时，在瓶中放40~50根脱毒苗为宜；同时快繁脱毒苗应控制苗的节间。

　　4瓶苗污染的控制

　　在脱毒瓶苗的继代培养过程中，常因种种原因出现细菌类和真菌类污染，细菌污染苗极弱，且扩繁后下一代大部分表现为细菌污染，在生产中通常用抗生素来处理细菌污染。对于真菌污染的脱毒瓶苗，除严格操作规程外，可在培养基中配制不同浓度多菌灵来减轻瓶苗污染率。最主要是快繁留的基础脱毒苗没有细菌和真菌的污染。而对于继代扩繁4年以上的瓶苗，要定期进行病毒检测确认是无病毒苗。因此，要定期更新脱毒瓶苗，每年应通过剥离茎尖组织的办法培养新鲜无病毒瓶苗，以确保继代培养脱毒瓶苗质量。

　　5无菌操作室内消毒灭菌

　　5.1操作前消毒

　　一是无菌室刚开始工作或间隔1~2个月未进行消毒时，先把高锰酸钾倒入培养皿，再倒入甲醛，关闭门窗进行熏蒸消毒，间隔1~2d即可在室内工作；二是将工作服、口罩、拖鞋、盛装75%的酒精瓶、剪刀、镊子、苗源瓶、快繁瓶等无菌室所需物品放在无菌室固定位置，启动超净工作台，通风杀菌，并将室内紫外灯打开消毒，工作人员快速离开无菌室，灭菌25~30min即可。

　　5.2操作中消毒

　　工作人员进入隔离间，穿戴好消毒服装，在组培室用75%的酒精将双手消毒，再用酒精泡的酒精棉擦超净工作台，同时将镊子、剪刀和支撑干用酒精擦过后，放在加热器进行5~6s的消毒，并将已挑拣好的无污染的脱毒苗放在超净工作台上，先打开灭菌过的快繁瓶放在超净工作台上，然后拧开脱毒苗瓶的口，用已灭菌过的镊子将脱毒苗瓶中的小苗夹出瓶口，只留根部在瓶内，用剪刀剪掉根部，然后再用镊子夹小苗离快繁瓶口1~2cm（注意不要让小苗挨上快繁瓶瓶口，以防感染），剪带1片小叶茎放在快繁瓶中。盖上盖子，在苗瓶外壁用打号枪注明该品种的编号及快繁日期。

　　6定期检查

　　放在生长间的快繁脱毒苗，一般每隔7d要用稀释好的清洁尔灭喷撒灭菌，每天早关灯和晚开灯时，发现有污染的瓶苗，必须马上将其拿出生长间，并放入高压灭菌锅灭菌，然后用清洁热水加入适量洗衣粉，用刷子涮洗苗瓶，并换水冲洗，然后倒置木架上晾干水珠待用。健康苗20多天就可快繁或移栽温室。

　　7取苗

　　在取苗时，有时也有真菌污染的脱毒苗，不能作快繁苗但可以作移栽苗。如果下一批苗要得急，取苗的同时需做培养基，若在同一间进行，带有真菌的脱毒苗被取出时，就会污染正在做的培养基，故应分开进行。