蒺藜总黄酮提取工艺的研究论文(2)

　　2.4.1 精密度考察精确称取样品粉末约2 g，按照待测样品制备方法制备待测样品溶液，准确吸取待测溶液1.0 ml,置于10 ml容量瓶中，加蒸馏水定容至10 ml，按“2.1.2”项下的方法，在510 nm下测定其吸光度A，5次测定的平均吸光度为0.061 3，RSD为0.67%，说明仪器的精密度良好。

　　2.4.2 稳定性研究将上述溶液每隔10 min测定1次吸光度，5次测定的平均吸光度为0.066 2，RSD为1.21%(n=5)，表明待测样品溶液在1 h内稳定。

　　2.4.3 重复性考察将上述溶液平行制备5份待测溶液，测定其吸光度，5次测定的总黄酮得率平均为6.3 mg/g，RSD为0.912%，说明方法的重复性好。

　　2.4.4 加样回收率实验分别精密吸取一定量的待测样品溶液，按照上述方法测定其吸光度，计算回收率，平均回收率为100.73%，RSD为1.35%(见表1)，表明方法的回收率较好表1 加样回收率实验已知样品量m/g加入对照品量m/g测定量m/g回收率(%)平均回收率(%)

　　3 结果

　　3.1 总黄酮提取方法的选择浸泡法：取蒺藜粉末2 g，用15倍量的80%乙醇浸泡3次，2 h/次，抽滤，合并滤液回流法：取蒺藜粉末2 g，用15倍量的80%乙醇提取3次，2 h/次，抽滤，合并滤液。用以上两种提取方法提取蒺藜总黄酮，依次测定其中总黄酮含量，得出回流法提取总黄酮的含量最高为6.612 mg/g，其次是浸泡法为5.263 mg/g。故选用回流法作为蒺藜总黄酮的提取方法，并通过下面正交实验选择最佳提取条件。

　　3.2 总黄酮提取的正交实验在选择回流作为提取方法的基础上，拟定乙醇浓度、乙醇用量、提取温度、提取时间作为考察因素，每个因素取3个水平，固定提取次数为3次，选用L9(34)正交表进行实验。因素水平见表2，以提取物中总黄酮的得率为考察指标。结果见表3　对于总黄酮的提取，通过直观分析，B因素影响不显著，故以B因素作为误差进行方差分析。结果见表4。根据表2和表3可以看出料液比、乙醇浓度对指标影响不显著，提取温度对指标有显著性影响(P<0.05)，提取时间对指标有极显著的影响　　3.3 最佳提取条件的验证按照上述确定的最佳条件，做5次平行实验，得出总黄酮的含量比正交实验中的任何一次实验的含量都高，平均为7.152 mg/g，RSD为0.646%。这就进一步说明了正交实验所得到的上述最佳条件为蒺藜总黄酮提取的较为理想的工艺表2 因素水平　表3 L9(34)正交实验设计以及结果表4 方差分析

　　4 讨论

　　基于回流提取方法，设计了较为合理的4因素3水平的正交实验，选用了4种因素，研究对蒺藜中总黄酮提取的影响，实验结果表明回流提取技术与传统的浸泡相比较具有提取时间短、总黄酮得率高等优点。根据实验结果，最终确定提取工艺如下：取粉碎的蒺藜粉末适量，提取时间为1.5 h,乙醇浓度为70%,提取温度为70～75℃,料液比为1∶15(g/ml)。

　　本研究选用正交实验法优化实验条件，大大提高了蒺藜中总黄酮的提取效率。为蒺藜中黄酮类化合物的深入研究和为蒺藜药用成分的进一步开发利用提供依据。

【参考文献】 （转载自http://zw.nseac.coM科教作文网）

  　　[1] 蔡利锋，景凤英，张建国，等.蒺藜化学成分的研究[J].药学学报，1999, 34(10): 759.