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中药蛇胆的鉴别及质量控制现状论文(2)

2013-09-27 01:04 其他氨基酸的种类和含量非常相似;蛇胆汁中微量元素Ca、Mg、Fe、Zn、Cu的含量均略高于鸡胆汁。黄晓文等[10]通过胆囊外观性状，胆汁的K2Cr2O7沉淀、糠醛-硫酸显色反应以及薄层色谱法(TLC)，鉴别了眼镜蛇胆检品，认为该方法简单、专属性强，可作为真伪蛇胆的鉴别方法。植达诗[11]用糠醛-硫酸法鉴别了蛇胆及其伪品鸡胆、鸭胆、鱼胆等;钟荣华[12]用糠醛-硫酸法成功鉴别了蛇胆、鸡胆、鸭胆和黄鳝胆等，认为该法结果可靠，简便易行，但不能鉴别蛇类种属。薄层层析法由于具备色谱分离特性，因此更适合分析复杂样品。孙方人等[13]以牛磺胆酸为对照用薄层层析法分析了眼镜蛇蛇胆样品并见到8个显色斑点;游勇基等[14]及唐元军等[15]分别用TLC法鉴别了蟒蛇胆;薛漓[2]还用TLC法成功鉴别了蛇胆及特殊伪品——熟地黄提取液。此外，TLC法还被广泛用于蛇胆复方制剂的鉴别研究。万京桦等[16]构建了蛇胆川贝枇杷膏中蛇胆汁的TLC法鉴别方法;陈德球[17]用蛇胆汁及牛磺胆酸钠作对照，采用TLC法鉴别蛇胆川贝液中的蛇胆;管玉民[18]用TLC法鉴别了蛇胆川贝液处方中的蛇胆汁;王倩等[19]用TLC法从蛇胆追风丸中成功检测出了蛇胆;蒋伟杰等[20]用TLC法从蛇胆菠萝蛋白酶肠溶薄膜衣片中鉴别出了蛇胆。综上所述，牛磺胆酸等成分为对照用TLC法可有效鉴别出复方制剂中的蛇胆，但不能区别蛇胆的种属来源。

　　1.4分子生物学鉴定

　　由于蛇胆保存和制剂加工过程中的处理方法往往破坏了蛇胆的完整性，因此依据性状、显微特征及理化性质进行鉴别有一定困难，分子生物学方法能克服上述问题，呈现更客观的结果。众所周知，物种的多样性是基因多态性的结果，而基因多态性可在分子水平上检测，它比在形态、组织和化学水平上检测更能代表其变异类型的遗传标记。王义权等[21]将分子标记技术运用到蛇类药材的鉴定研究中，对游蛇科10种蛇基因组DNA的多态性进行了分子遗传标记的研究;通过提取金钱白花蛇及其伪品药材和原动物样品的模板DNA，分析其Cytb基因片断鉴别了金钱白花蛇[22];沈曦等[23]通过比较12SrRNA和Cytb基因的部分序列鉴别了几种蝮属蛇类;刘向华等[24]从药材蛇胆的胆衣和胆汁、原动物棕黑锦蛇的肌肉和胆汁中提取DNA，经PCR扩增12SrRNA基因片段，鉴别了蛇类药材。分子生物学鉴别方法虽能有效鉴别出蛇类药材的种属来源，目前在蛇类药材的鉴别中应用较广，但由于市售蛇胆样品的复杂性，蛇胆DNA的含量较低，故此法在蛇胆鉴别中的应用较少，具体应用方案还有待于进一步完善。

　　2蛇胆及其制剂的含量测定

　　目前蛇胆药材及其制剂中蛇胆的含量测定多以总胆酸或牛磺胆酸盐为指标，测定方法主要是紫外分光光度法、薄层扫描法(TLCS)和高效液相色谱法(HPLC)。梁意红[25]、罗敏等[26]、曾常青等[27]先后采用TLCS法测定了蛇胆药材中牛磺胆酸的含量;殷军等[28]采用硫酸-糠醛法显色法测定了蛇胆胆酸的含量;黄西峰等[29]用紫外分光光度法测定了蛇胆中总胆酸的含量;张丹等[30]和钟然等[31]分别采用HPLC法测定蛇胆中牛黄胆酸的含量。温金莲等[32]用分光光度法测定了蛇胆糖浆口服液中胆酸的含量;孔广英等[33]采用紫外分光光度法测定了牛黄蛇胆川贝液中的总胆酸含量;岑淑姬[34]和黎明[35]分别采用HPLC法和TLCS法测定蛇胆川贝液中牛磺胆酸含量;金阳[36]建立了蛇胆陈皮胶囊的质量标准，采用TLC法鉴别了蛇胆，用HPLC法测定了牛磺胆酸钠的含量;邬威尧[37]采用TLCS法测定了蛇胆川贝散中牛磺胆酸的含量;吴兵兵[38]采用HPLC法比较了不同厂家蛇胆川贝胶囊中牛磺胆酸钠的含量差异。由于蛇胆功效成分尚不明确，目前蛇胆含量测定所选择的指标专属性不强，因此含蛇胆的中药复方制剂牛黄蛇胆川贝液等的质量标准还有待于进一步提高。

　　综上所述，蛇胆的质量控制研究虽历史悠久，但由于技术方法的制约，目前各种方法均存在一定的缺陷，2010版药典中亦缺乏较为全面的质量控制方法。随着研究手段的不断进步，运用先进的分子生物学手段，采用多种鉴别方法综合验证、多指标综合控制，从而制定更完善的质量标准是今后蛇胆质量控制的必然趋势。

【参考文献】 （科教作文网http://zw.nseAc.com）

  　[1] 王沛，郭秀云. 蛇胆的药用与鉴别[J].吉林中医药，1991，11(1):36.

　　[2] 薛漓. 一种新的蛇胆掺假品的鉴别[J].中南药学，2003，1(5):305-306.