茶氨酸抗肿瘤作用及其机制的研究进展(2)

　　4.1生物调节作用机制

　　在茶氨酸转运机制方面，Sugiyama等[12]发现，茶氨酸能够通过改变某些肿瘤细胞(M5076卵巢肉瘤细胞)的细胞膜通透性，提高抗肿瘤药物吡柔比星(THP)和多柔比星(DOX)在胞内的浓度，达到增强药物抗肿瘤活性的作用。数据显示，茶氨酸使THP在M5076卵巢肉瘤细胞中浓度提高了1.3倍，治疗效果增强了1.7倍。研究还发现茶氨酸能够抑制THP和DOX从肿瘤细胞内流出，但是不能增强THP和DOX向肿瘤细胞内流入。茶氨酸在辅助治疗癌症、抑制肿瘤迁移中的作用也可以得到解释。茶氨酸通过抑制药物从胞内流出，提高药物在胞内的浓度，增强了药物抗肿瘤活性，使得转移的肿瘤细胞在血管内循环，到达目标组织之前就被高浓度的抗肿瘤药物杀死，从而起到了抑制肿瘤迁移的作用[8]。通过对P388白血病细胞的研究发现，茶氨酸可以作用于耐药与不耐药两种P388细胞共同的膜转运系统，抑制药物流出细胞[13]。

　　那么茶氨酸是如何提高药物在肿瘤细胞内浓度的呢?考虑到茶氨酸与谷氨酸盐结构类似，有学者对谷氨酸盐载体在茶氨酸生物活性中的作用进行了研究[14]。在M5076卵巢肉瘤细胞中，谷氨酸盐载体抑制剂dihydrokainate(DHK)，L-α-aminoadipate(AAD)，D,L-threo-β-hydroxyaspartate(THA)，能够抑制DOX的流出，但不能影响DOX的流入，这与茶氨酸的作用相似，表明茶氨酸能够作用于谷氨酸盐载体。通过RT-PCR和蛋白免疫印迹分析技术发现，M5076细胞膜上存在2个高亲和力的亚型谷氨酸盐载体GLAST和GLT-1，茶氨酸极有可能通过这两个亚型谷氨酸盐载体发挥作用。而GLAST和GLT-1在心脏和肝脏中不存在，虽然在脑组织中有表达，但DOX不能通过脑屏障，因此茶氨酸在心脏、肝脏及脑组织中不增强DOX的毒副作用。谷氨酸盐载体可以把谷氨酸盐转运进入细胞，谷氨酸盐在细胞内的浓度，与DOX的流出有关。因此茶氨酸可能是通过作用于亚型谷氨酸盐载体GLAST和/或GLT-1，竞争性抑制M5076细胞对谷氨酸盐的吸收，使谷氨酸盐在肿瘤细胞内浓度下降，从而抑制DOX流出。

　　谷氨酸盐在细胞内的浓度降低可抑制DOX流出。ATP依赖的谷胱甘肽-S-结合物(GS-X)输出泵与谷胱甘肽-DOX结合物(GS-DOX)有高度的亲和力，可将GS-DOX泵到胞外。GS-DOX由谷胱甘肽与DOX经谷胱甘肽-S-转移酶催化生成。谷氨酸盐是生成谷胱甘肽的底物，谷氨酸盐在细胞内的浓度降低，谷胱甘肽的合成就相应减少，DOX与谷胱甘肽结合的数量也相应减少，DOX不能形成GS-DOX复合物被泵到体外，这样就在肿瘤细胞内得到保留[15]。

　　综上所述，茶氨酸的生物调节作用机制是通过抑制细胞对谷氨酸盐的吸收，降低细胞内谷胱甘肽的生物合成，使GS-DOX生成量减少，DOX不能被泵出细胞，在胞内积累，从而增强了DOX的抗癌效果。

　　4.2抗癌作用机制

　　Calle等通过流行病学调查发现，癌症的发生与肥胖相关[16]，虽然相关机制目前尚不清楚。脂肪酸合成酶(FAS)和胆固醇都是导致肥胖的因素。Chiang等[17]人发现普洱茶中的成份儿茶素、咖啡因和茶氨酸可以抑制FAS的表达，此外Zhang等还发现茶氨酸对减少体内胆固醇有效[18],茶氨酸可能通过抑制FAS表达，降低胆固醇含量，发挥抗癌作用。

　　γδT细胞杀伤肿瘤细胞是非MHC限制性的，研究报道在各种实体瘤浸润淋巴细胞中均发现γδT细胞的表达和抗肿瘤效应。临床研究发现，口服茶氨酸可以增强γδT细胞活性，促进γδT细胞分泌IFN-γ [19]，抑制肿瘤。其机理可能是，茶氨酸在肾脏被分解释放出乙胺，乙胺通过抑制甲羟戊酸通路，诱导产生异戊烯焦磷酸(IPP)，IPP是γδT细胞抗原，可以促进γδT细胞增殖[20]。

　　树突状细胞(DC)是功能强大的抗原提呈细胞，具有激活静息型T细胞及诱导初级免疫应答的能力。雷明盛[21]证明茶氨酸可能是通过抑制COX-2的表达，减少内源性的IL-10合成，促使DC成熟，从而促使IL-12分泌，调节IL-10/IL-12的平衡，激活细胞毒性T淋巴细胞(CTL)，促使CTL增殖或穿孔素产生来实现抗癌作用。另外，雷明盛[21]还证明，茶氨酸刺激DC调节T淋巴细胞抑制SCID小鼠肺腺癌移植瘤，可能是通过免疫监视及清除畸变细胞作用，以及下调血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平，抑制肿瘤血管形成等机制来实现。

　　茶氨酸的直接抗癌作用研究起步较晚，目前还在初级阶段，相关机制的研究还不够透彻，随着分子生物学技术的发展，一些新的作用位点，越来越多地被发现，通过对免疫调节分子机制，特别是细胞信号传导通路方面更加深入的研究，也许可以从中找到答案。

　　5展望