新型黑麦酮酸D衍生物D69抗乳腺癌活性研究(3)

　　为检测D69对非肿瘤细胞的毒性，以人永生化乳腺上皮细胞HMEC为模型，在倒置光学显微镜下观察D69处理后的细胞生长情况及形态学变化，发现与对照组相比，D69对HMEC细胞生长的抑制作用较人乳腺癌细胞MDA-MB-435和ZR-75-30要小得多。

　　2.3D69对MDA-MB-435、ZR-75-30和HMEC细胞生长的抑制效应

　　MDA-MB-435、ZR-75-30和HMEC细胞分别以不同浓度的D69处理48 h，MTT结果显示，D69以剂量依赖型的方式抑制人乳腺癌细胞MDA-MB-435和ZR-75-30的增殖。其中对MDA-MB-435细胞的抑制率最高，其作用48 h后的IC50为0.031 μmol/L。其次是ZR-75-30细胞，IC50为0.036 μmol/L，而D69对于人永生化乳腺上皮细胞HMEC的抑制率最低，IC50为0.686 μmol/L，见图4。[PSa6682;S*3〗图2人乳腺癌细胞ZR-75-30经不同浓度D69处理后的形态变化(200×,48 h)　Figure 2Morphological changes of human breast cancer cells ZR-75-30 treated with indicated concentrations of D69 (200×,48 h)　　[PSa6683;S*2〗图3人永生化乳腺上皮细胞HMEC经D69处理后的形态变化(200×，48 h)Figure 3Morphological changes of HMEC treated with indicated concentrations of D69 (200×,48 h)

　　2.4裸鼠异体移植瘤模型中D69的体内抗肿瘤作用

　　体内抗肿瘤实验证明，与对照组相比，给药组能显著地抑制肿瘤的生长，其肿瘤抑制率为81.11%，差异具有显著性，对肿瘤的抑制效果更为明显。实验过程中，小鼠的体质量并没有明显的改变。见图5、表1。[PSa6684;S*2〗图4D69对MDA-MB-435、ZR-75-30和HMEC细胞生长的剂量-效应曲线

　　3讨论

　　能够产生黑麦酮酸系列化合物的真菌广泛分布于各种陆地和海洋[12-14]。到目前为止，已经有6种(A、B、C、D、E、F、G)不同的黑麦酮酸被发现。研究表明，黑麦酮酸D比其他5个同系物具有更强的药理活性，同时具有更小的毒性 [15]。本文所涉及的活性化合物D69是从南海海洋微生物的次生代谢产物中筛选得到的，具有黑麦酮酸基本骨架的一种结构新颖的黑麦酮酸D衍生物。

　　本文研究了黑麦酮酸D衍生物对人乳腺癌细胞的抗肿瘤活性。MTT体外实验结果显示，D69对于人乳腺癌细胞MDA-MB-435和ZR-75-30的增殖具有明显的抑制作用，IC50分别为0.031 μmol/L和0.035 μmol/L;而对于人永生化乳腺上皮细胞HMEC的抑制率最低，这说明对于乳腺癌细胞来讲，D69对于肿瘤细胞的选择性毒性较强，而对于非肿瘤的永生化乳腺细胞毒性较弱。为了进一步确认D69的抗肿瘤活性以及其对正常细胞、组织的低毒副作用，本文建立了稳定的人MDA-MB-435乳腺癌移植瘤裸鼠模型，结果表明，D69对于裸鼠体内乳腺癌移植瘤的生长亦具有显著抑制作用，且小鼠的体质量没有明显的改变。体内和体外实验结果均提示D69是一个非常有希望的具有抗肿瘤活性的小分子化合物，但其抗肿瘤的分子机制及细胞内分子靶点还有待于进一步的实验探讨。

【参考文献】