消痤饮提取工艺的研究论文(2)

　　按处方称取各药材适量，精密称定，共9份，按表2所列因素水平加不同体积的水浸渍后煎煮不同次数，提取液过滤后合并，浓缩至适量，加入不同体积分数乙醇，搅拌，静置24 h，滤过，滤液回收乙醇至干，浸膏用与醇沉时同体积分数乙醇定容于50 mL容量瓶中，摇匀，备用。表1因素水平表

　　2.3提取物得率的测定

　　精密量取供试品溶液30 mL，移至事先已干燥至恒重并已称重的蒸发皿中，水浴挥发至干后，在电热恒温鼓风干燥箱中于105 ℃干燥至恒重，称重。减去空蒸发皿质量，即得干膏重，计算其与所用药材的比值即为提取物得率。

　　2.4总黄酮含量测定

　　2.4.1测定波长的选择精密称取芦丁对照品适量，加60%(体积分数)乙醇使其溶解，制成质量浓度为0.2 mg·mL-1的对照品溶液。精密吸取对照品溶液4 mL于25 mL容量瓶中，加入蒸馏水6 mL，加5%(质量浓度)NaNO2溶液1 mL，混匀，放置6 min，加10%(质量浓度)Al(NO3)3溶液1 mL，摇匀，放置6 min，加4%(质量浓度)NaOH溶液10 mL，再加蒸馏水至刻度，摇匀，放置15 min。精密移取“2.2”项下供试品溶液1 mL至25 mL容量瓶中，同法显色。采用紫外-可见分光光度法进行全波长扫描，对照品、供试品溶液均在506 nm处有最大吸收，故选择506 nm为测定波长。

　　2.4.2标准曲线的制备[3]分别精密吸取对照品溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 mL于25 mL容量瓶中，按“2.4.1”项下方法显色，于506 nm测定吸光度，以芦丁对照品质量浓度(ρ)为横坐标，吸光度(A)为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程为A=9.3773ρ-9.1×103，r=0.999 5，线性范围为7474 ~44.844 μg·mL-1。

　　2.4.3含量测定精密吸取“2.2”项下供试品溶液1 mL，至25 mL容量瓶中，按“2.4.1”项下方法显色，于506 nm测定其吸光度，计算总黄酮的含量，见表2。方差分析见表3、4。表2正交试验结果与直观分析表3提取率方差分析表表4总黄酮含量方差分析表由表2、3可知，对提取物得率而言，因素B、D的影响具有统计学意义，因提取2次后杂质含量少于提取1次后的杂质含量，故选择较优方案为A2B3C2D2。由表2、4可知，对总黄酮含量而言，因素C、D的影响具有统计学意义，结合节能方面考虑，其较优的方案为A1B1C2D2。2个方案中C2、D2是共同选项。而因素B对总黄酮含量的影响无显著性，从提高提取物得率的角度出发应选择B3;因素A对2个测定指标的影响均无意义，故从简化工艺角度考虑选择A1。因此最佳提取工艺为A1B3C2D2，即浸渍时间为0.5 h，溶媒用量为13倍，煎煮次数为2次，醇沉体积分数为60%。

　　2.6验证试验

　　按最佳工艺条件平行提取3份样品，提取物得率分别为20.21%、19.82%、20.40%，RSD为1.47%;总黄酮质量分数分别为5.70、5.84、5.59 mg·g-1，RSD为2.19%。

　　3讨论