研究地榆提取物的抗氧化与抗过敏作用及其相关(2)
2014-04-29 01:30
导读：不加洗脱溶液，再分别加入0.02%的H2O2 1 ml，未损伤管不加H2O2，最后补充各管体积至8 ml。于37℃下保温1 h，测在510 nm下的吸光度，重复两次，计算其平均值。
不加洗脱溶液，再分别加入0.02%的H2O2 1 ml，未损伤管不加H2O2，最后补充各管体积至8 ml。于37℃下保温1 h，测在510 nm下的吸光度，重复两次，计算其平均值。
OH的清除率（%）=［（A2-A1）/（A0-A1）］×100%
A0：未损伤管的吸光度；A1：损伤管的吸光度；A2：加样品并扣除样品空白后的吸光度。
2.3.2 过氧化氢清除实验［10］清除过氧化氢能力的测定按文献方法并加以改进，以pH=7.4的磷酸盐缓冲溶液配制10 mmol·L-1H202溶液，取5 ml上述溶液加入5 ml样品液（0.4 mg·ml-1），混匀后用紫外分光光度计测定其在230 nm处的吸光值A1，实验中以不加样品液的H2O2溶液吸光值为A0，以不加H2O2溶液的样品溶液的吸光值为A2。
过氧化氢的清除率(％)=［A0-(A1-A2)］／A0×100%
2.3.3 DPPH清除实验［11］分别取2 ml不同浓度的试样液于试管中，加入 2×10-4mol·L-1的DPPH· 溶液2 ml，混合均匀，反应30 min后在517 nm处测定其吸光度，同时测定试样空白以及不加试样液的空白样的吸光度。按下式计算其对DPPH· 抑制率：
DPPH·清除率（%）=［1－（A1－A2）/A0］× 100% 式中：A1=2 ml DPPH· 溶液 2 ml试样液的吸光度；A2=2 ml试样液 2 ml无水乙醇的吸光度； A0=2 ml DPPH· 溶液 2 ml无水乙醇的吸光度。
3 结果
3.1 各提取物的透明质酸酶抑制率原花青素、儿茶素都具有强有力的抗氧化作用，抗过敏作用。从表1可以看出，样A经溶剂萃取后得到样E，样E经大孔树脂纯化后得样H，其透明质酸酶的抑制率分别为47.70%，62.00%，76.00%，逐步升高。样H的活性超过儿茶素，且提取率相对于其他样品是较高的，因此选择A，E，H作为下面抗过敏与抗氧化作用量效分析的样品。从羟基自由基清除率与过氧化氢清除率来看，样H的清除率是所有提取物最高的，其自由基清除率接近于原花青素和芦丁，大于维生素C和儿茶素；过氧化氢清除率接近于原花青素，大于芦丁、维生素C、儿茶素。因此，样H在本实验中显示了与原花青素相近的活性。
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本实验对样品H进行了试管预测：①样品H可以使明胶溶液产生沉
