探讨大豆苷元对神经母细胞瘤细胞增殖的抑制作(2)
2015-04-19 01:08
导读：表1 大豆苷元对SH-SY5Y细胞增殖抑制率的影响（略） 与对照组比较，★P＜0.05；n=3 １．２．４ 流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期分析各组细胞培养４８
表1 大豆苷元对SH-SY5Y细胞增殖抑制率的影响（略）
与对照组比较，★P＜0.05；n=3
１．２．４ 流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期分析各组细胞培养４８ ｈ 后，收集各组细胞悬液１ ｍｌ，浓度约为１０６ 个／ｍｌ，１ ０００ ｒ／ｍｉｎ 离心５ ｍｉｎ，弃掉培养液，用ＰＢＳ 离心冲洗两次，以７０％的冷乙醇固定，４℃保存１ ～２４ ｈ，１ ０００ ｒ／ｍｉｎ 离心５ ｍｉｎ 后，ＰＢＳ 洗涤冲洗去乙醇２ 次；加入ＲＮａｓｅ Ａ（终浓度为６０ μｇ／ｍｌ），摇匀，３７℃温育３０ ｍｉｎ；加入ＰＩ（终浓度为５０μｇ／ｍｌ）染料１ ｍｌ，４℃暗染３０ｍｉｎ。流式细胞仪检测，每份标本测定（４ ～８） ×１０３ 个细胞，采用ＭｏｕｆｉｔＬＴ 软件对各组样本进行ＤＮＡ 含量及细胞周期分析。
１．３
统计学方法实验均重复３ 次以上。所有的测定指标均采用±s表示，用ＳＰＳＳ １４．０ 统计软件包进行分析，凋亡实验用方差分析，细胞增殖实验用t检验。以P ﹤ ０．０５ 表示差异有显著性。
２ 结果
２．１ 大豆苷元对ＳＨ －ＳＹ５Ｙ 细胞的生长抑制作用细胞增殖抑制实验结果显示，与正常对照组相比，大豆苷元各浓度组处理２４～７２ ｈ 的细胞抑制率与正常对照组比较均有显著性升高（P＜０．０５）（表１，图１）。大豆苷元处理ＳＨ －ＳＹ５Ｙ 细胞２４，４８，７２ ｈ的ＩＣ５０ 分别是６５．０，４７．０，４０．０ μｇ／ｍｌ。以上结果表明大豆苷元对ＳＨ －ＳＹ５Ｙ 细胞的体外增殖具有较强的抑制作用，其抑制作用在一定的范围内有剂量和时间依赖性，并呈现出一定的饱和性。
图1 大豆苷元对SH-SY5Y细胞体外增殖的抑制作用（略）
（转载自http://www.ＮＳＥＡＣ.com中国科教评价网）
２．２ 大豆苷元对ＳＨ －ＳＹ５Ｙ 细胞周期和凋亡的影响药物处理４８ ｈ 后，大豆苷元各浓度组均能诱导Ｈ －ＳＹ５Ｙ 细胞凋亡，Ｇ１ 峰前出现亚二倍体峰（Ｓｕｂ －Ｇ１ ），即凋亡细胞所特有的凋亡峰（图２）。大豆苷元诱导ＳＨ －ＳＹ５Ｙ 细胞凋亡呈现一定的剂量依赖性，细胞凋亡率显著高于正常对照组（P ＜０．０５）。随着大豆苷元浓度的升高，Ｇ０ ／Ｇ１ 和Ｇ２ ／Ｍ 期的细胞明显减少，ＤＮＡ 合成期（Ｓ期）细胞数均明显增多，表明大豆苷元使ＳＨ －ＳＹ５Ｙ 细胞发生Ｓ期阻滞，抑制细胞增殖。
图2 大豆苷元对SH-SY5Y细胞周期和凋亡的影响（略）
３ 讨论
ＮＢ 治疗十分棘手，人们一直在积极寻找新的治疗药物。我国中医中药用于治疗肿瘤历史悠久，具有疗效确切、毒副作用低等优点。大豆异黄酮是重要的植物
化学物质，由１２ 种单体组
