死亡受体5诱导Jurkat细胞凋亡的作用论文(2)
2015-04-24 01:01
导读：1.2.1.1抗DR5 mAb制备参照文献［2］制备抗DR5 mAb. 抗DR5 mAb类型经ELISA法测定mAb的类型分别为IgG1(YM 366, YM 369)和IgM (YM 362, YM 363, YM 367 )，两者均可与sDR5结合，经流
1.2.1.1抗DR5 mAb制备参照文献［2］制备抗DR5 mAb. 抗DR5 mAb类型经ELISA法测定mAb的类型分别为IgG1(YM 366, YM 369)和IgM (YM 362, YM 363, YM 367 )，两者均可与sDR5结合，经流式细胞仪分析发现仅IgG能与Jurkat 细胞表面的DR5结合.
1.2.1.2流式细胞仪分析mAb与胞膜DR5结合取生长状态良好的Jurkat细胞，用含 50 g/L BSA 的PBS洗涤3次，计数细胞，取1×105细胞与杂交瘤细胞培养上清100 μL混合，冰浴反应30 min. 预冷PBS洗涤细胞3次，然后每孔加1 μL FITC标记的山羊抗小鼠IgG或IgM（Jackson Immuno Research），冰浴30 min. 预冷PBS洗涤细胞3次，流式细胞仪进行分析（FACScan, Becton Dickinson）.
