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高效液相色谱法测定水煎法提取中成药中的甘草

2017-10-05 03:14 作者：杜学勤，刘焕蓉，郭志强，邓并【摘要】 目的建立HPLC法测定以水煎法提取19种中成药中甘草酸（GA）的含量。方法采用日本岛津PC8色谱柱；流动相为甲醇-水-醋酸（57.0∶42.6∶0.4）；检测波长为254 nm；流速2.0 ml·min-1。结果甘草酸在200～2000 μg·ml-1，r=0.999 7的浓度范围内线性关系良好，平均回收率为96.55%，RSD=1.1%；同时研究了22种单味药对甘草中GA含量测定的影响。结论 通过与冷浸法比较，水煎法和冷浸法提取中成药中GA含量差值较大，且水煎法的偏低。 【关键词】 中成药；甘草酸；高效液相色谱法；水煎法
　　Determination of Glycyrrhizic Acid in the Water Extraction in Chinese Patent Medicine by HPLC　　Abstract：ObjectiveAn HPLC method was established for the determination of glycyrrhizic acid (GA) by extracting method of decoction in 19 kinds Chinese patent medicine prepared in laboratory.Methods PC8 column was used with methanol-water-cuetu acid (57.0∶42.6∶0.4) as mobile phase. The flow rate was 2.0ml·min-1 and detection wavelength was 254nm.ResultsThe linear relationship was good when the content of glycyrrhizic acid (GA) was in the range of 200～2 000 μg·ml-1（r=0.999 7）.The average recovery and RSD were 96.55% and 1.1% respectively. The paper also studied the interference determination of GA by selecting interrelation 22 kinds of single medicinal material.ConclusionBy comparison the decoction with the infusion ，the results shows that the content of GA by extraction decoction was lower than that by infusion.　　Key words： Chinese patent medicine ; Glycyrrhizic acid; HPLC; Decoction 甘草为豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch.，胀果甘草Glycyrrhiza inflata Bat.或光果甘草Glycyrrhiza glabra L.的干燥根及根茎，具有补脾益气、清热解毒、祛痰止咳、缓急止痛、调和诸药之功［1］，被广泛用于中药制剂处方中。甘草中主要活性成分为甘草酸［2］(glycyrrhizic acid，GA)，因此,我们选定甘草酸作为含甘草中成药的质量控制指标。甘草酸的含量测定方法报道很多，但大多数方法操作复杂，定量不够精确。近年来, 高效液相色谱法测定GA也已有报道［3～6］，但对水煎法提取中成药中GA含量测定方法尚未见报道。本文在冷浸法研究的基础上采用高效液相色谱法测定水煎生药中的GA和不同剂型中药复方制剂中的GA含量，为评价含GA药材及其制剂的质量提供了一个准确、灵敏、快速的测定方法。　　1 仪器与试药　　1.1 仪器　　日本岛津LC3A型高效液相色谱仪；日本岛津SPD-1型紫外吸收检测器；日本岛津C睷IB型色谱仪数据处理机。　　1.2 试剂无水甲醇、冰醋酸（均为分析纯，北京化工厂生产）；甘草酸铵盐对照品：（旋光度［a］20D60.5熔点209℃）纯度88.00%（内蒙呼和浩特天然甜素厂）；粉甘草（山西产）。 单味中药材：滑石、朱砂、香附、陈皮、紫苏叶、葛根、黄芩、黄连、玄参、麦门冬、桔梗、麻黄、杏仁、生石膏、萆薢 、乌药、石菖蒲、益智仁、生地黄、当归、防风、蒲公英、金银花、连翘、紫菀、百部、海螵蛸、白芍、党参、白术、元胡、大黄、芒硝、枳实、厚朴、人参、茯苓、法半夏、橘红、木香、砂仁、冰片、川芎、白芷、羌活、细辛、薄荷、荆芥、柴胡、赤芍、桂枝、五味子、干姜、大枣（均为市售）。　　2 方法与结果　　2.1 色谱条件色谱柱为日本岛津PC8柱（4 mm× 250 mm）；流动相：甲醇-水-醋酸（57.0∶42.6∶0.4）；流速2.0 ml·min-1；柱温：40℃；纸速2.5 mm·min-1；检测波长254 nm；进样量5 μl。 （转载自http://zw.NSEAC.com科教作文网）
本文是在冷浸法测定GA含量研究的基础上，考察水煎法，从而进行比较。所以首选冷浸法的色谱条件，测定水煎法中药制剂及生药中甘草酸与其它成分的分离。结果见图1～2。　　2.2 对照品溶液制备取105℃干燥至恒重的甘草酸铵盐对照品精确称定，加甲醇制成每毫升含2.0 mg的溶液，热溶，作为对照品贮备液。