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正常妊娠及妊高征孕妇胎盘组织中细胞凋亡及增

2014-01-24 01:12 正常妊娠及妊高征孕妇胎盘组织中细胞凋亡及增殖基因表达的研究

目的：探讨正常妊娠及妊高征（ PIH）孕妇胎盘组织bcl－2、bax及 ki67基因的表达及其相互关系。方法：采用免疫组化方法测定正常早、中、晚期妊娠30例及轻、中、重度 PIH36例的胎盘组织 bcl－2、bax及ki67的表达。结果：（l）bcl－2表达主要定位在绒毛的合体滋养层细胞（S－cells），而 bax在 S－cells和细胞滋养层细胞（C－ceIIs）均呈阳性，在绒毛间质中baX也呈阳性表达，但强度低于滋养层细胞。ki67定位于C－ceIIs；（2）bcl－2在晚期妊娠组的阳性率低于早、中期妊娠组（P＜0．05）。ki67在正常早、中、晚期妊娠组，对照组与 PIH组，轻、中、重度 PIH组之间均有显著性差异（ P＜ 0.01）；（3）bcl－2和 bax表达及与 ki67的表达无相关性（P＞ 0．05）。结论：bcl－ 2及 bax在高水平上达到平衡，在胎盘组织中并不起介导细胞凋亡的主导作用，而且二者的表达不影响细胞的增殖。

胎盘 细胞凋亡 bcl-2 bax ki67

人类胎盘不仅在胎儿—胎盘—母体的关系上起中心轴的作用，而且功能上失调会导致母体和胎儿的病理性变化，随着妊娠的进展，绒毛和滋养层不断成熟和分化，已发现许多物质包括原癌基因产物，在胎盘有生理性的表达。胎儿的发展特征是细胞群增殖和诱导或抑制细胞凋亡成熟起来的，因此，胎盘在妊娠期间也经历着相似的变化。我们通过测定胎盘组织中细胞凋亡调控基因bcl-2、bax及细胞增殖基因ki67，进一步探讨了妊娠高血压综合征（PIH）的病理性变化。

1 资料与方法

1.1 临床资料 随机选择1998年11月至1999年4月白求恩医科大学第二临床医院及长春市妇产医院妇科门诊及产科病房的孕产妇66例。（1）妊高征组36例，平均26.14±3.42岁,平均孕37.44±3.9周,轻度9例,中度10例,重度17例；(2)正常妊娠组30例，孕早期10例，平均25.25±3.80岁，平均孕9.03±1.11周；孕中期5例，平均26.55±3.93岁，平均孕24.05±3.63周；孕晚期（对照组）15例，平均27.76±3.38岁，平均孕39.82±1.32周。

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1.2 标本采集及处理 孕早期是行人工流产术者，孕中期是来自无妊娠合并症、并发症，要求终止妊娠而行水囊引产者，孕晚期为单胎足月初产妇，无妊娠合并症、并发症、以自然分娩及择期剖宫产手主结束分娩，其剖宫产指标主要是头盆不称及社会因素。妊高征组孕妇是无慢性高血压、慢性肾炎及其它心肾疾病的病史者。

早孕绒毛组织不需进一步处理，取出后用生理盐水冲洗净，即用10%福尔马林液固定。中、晚期胎盘组织于分娩后立即在母体面（避开钙化、机化灶）随机取3个不同区域约2cm×2cm×2cm胎盘组织，生理盐水冲洗干净后立即放入10%福尔马林固定液中。

1.3 方法 用免疫组化SP法，抗bcl-2、抗bax、抗ki67单克隆抗体即用型及SP试剂盒均购自福州迈新生物工程公司。每次染色均设阳性和阴性对照。

1.4 结果判定 由2名医师独立观察切片中10个高倍视野。（1）阳性标准：SP法显示bcl-2及bax定位于胞浆和胞膜内，反应产物为棕黄色。根据显色程度分为4级：（-）为无着色，（ ）为淡黄色，（ ）为棕黄色，（ ）为棕褐色;（2）SP法显示ki67以细胞核呈清晰棕褐色为阳性，按阳性细胞占C-cells的比例分为：阳性细胞数＜10%为（-）；10%-20%为（ ）；20%-30%为（ ）；＞30%为（ ）。

1.5 统计学分析Fisher精确概率检验法，两组计数资料用等级相关分析。

2 结果

2. 1 正常妊娠期胎盘组织中bcl-2、bax及ki67的基因表达bcl-2表达主要定位在绒毛的S-cells，而bax在S-cells和C-cells均呈阳性，同时在绒毛间质中bax也呈阳性表达，但强度低于滋养层细胞；ki67蛋白主要定位在C-cells。bcl-2在晚期妊娠组的阳性率明显低于早、中期妊娠组（P＞0.05）；ki67在晚期妊娠组的阳性率明显低于早、中期妊娠组（P＜0.01）。早、中、晚期妊娠组bcl-2的表达强度与ki67的表达强度无相关性（P＞0.05），bax与ki67也无相关性（P＞0.05）。