一贴灵贴剂抗炎镇痛作用的实验研究(2)

　　1.3 实验方法

　　1.3.1 小鼠耳廓肿胀试验［1］ 取小鼠40只，雌雄各半，腹部脱毛，随机分为4组。模型组：生理盐水灌胃；阿司匹林组：阿司匹林灌胃，剂量为0.2 g/kg；贴剂Ⅰ组：给药剂量2.4 g/kg，贴于脱毛处皮肤上；贴剂Ⅱ组：给药剂量1.2 g/kg，贴于脱毛处皮肤上。除对照组灌胃外，其余各组动物每天贴敷2 h，连续用药2 d。于第3天贴敷或灌胃1 h，各组动物右耳两面涂二甲苯0.03 ml致炎。30 min后将小鼠脱臼致死，用直径7 mm打孔器分别在左右耳对称处取下圆形耳片，称重，以左右耳的重量差作为肿胀度，并计算肿胀抑制率。抑制率=(模型组肿胀度均值－用药组肿胀度均值)/模型组肿胀度均值×100%。

　　1.3.2 大鼠足趾肿胀试验［1］ 取大鼠40只，雌雄各半，腹部脱毛，随机分为4组，组别及用药方法同上，但剂量进行如下调整：阿司匹林0.1 g/kg，贴剂Ⅰ组1.5 g/kg，贴剂Ⅱ组0.75 g/kg。连续用药4 d，于第5天灌胃或贴敷用药30 min后，各组大鼠右后足趾皮内注射1%角叉采胶0.1 ml。用游标卡尺测量注射前及第5天用药1、2、3、4 h足趾厚度，以注射前后各时段足趾厚度之差作为肿胀度,计算抑制率。抑制率=(模型组肿胀度均值－用药组肿胀度均值)/模型组肿胀度均值×100%。
各组动物于用药4 h后,麻醉,腹主动脉抽血，于踝关节上0.5 cm处剪下足爪，剥皮，剪碎，浸泡于5 ml生理盐水中1 h，2 500 r/min离心，取上清液0.1 ml于试管中，按前列腺素E2（prostaglandin E2，PGE2）测定方法［2］测定PGE2含量。另取血清0.1 ml，采用放免药盒,按说明书要求操作，分别测定血液中IL1和肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factorα，TNFα）含量。

　　1.3.3 小鼠热板法疼痛试验［3］ 取雌性小鼠50只，腹部脱毛，随机分为5组，即正常组、阿司匹林组及贴剂3个剂量组，给药方法同上。阿司匹林剂量为0.6 g/kg，1次/d；贴剂剂量分别为2.4、1.2、0.6 g/kg。连续用药4 d。用药前，将小鼠放于热板盒上,控制温度在（55.0±0.5）°C，记录自放入热板盒至小鼠舔后足所需时间(s)，第2天再测1次，以连续两天的平均值作为给药前的基础痛阈值。第5天用药后0.5、1、2、4、6 h按上述基础痛阈值测定法分别测定痛阈值。

　　1.3.4 小鼠扭体法疼痛试验［3,4］ 取小鼠50只，雌雄各半，腹部脱毛，按上述方法随机分组及用药，剂量同上。连续用药4 d，第5天用药1 h后,每只小鼠腹腔注射0.6％的冰醋酸0.2 ml，分别测定10 min内小鼠的扭体次数。

　　1.4 统计学方法 采用t检验进行统计学处理。

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