VEGF在胃癌患者血清及肿瘤组织中的表达及其意义(2)

2014-10-10 01:16

导读：1.2 方法 1.2.1 血清标本采集在术前、术后第7天和术后6个月每月1次分别抽取清晨空腹静脉血3ml，离心分离血清，置于-20℃冻存待测。 1.2.2 血清VEGF定量检测

1.2 方法

1.2.1 血清标本采集在术前、术后第7天和术后6个月每月1次分别抽取清晨空腹静脉血3ml，离心分离血清，置于-20℃冻存待测。

1.2.2 血清VEGF定量检测采用双抗体夹心ELISA法，样本中的VEGF与酶标板上的抗人VEGF单抗结合，再与结合有生物素的抗人VEGF抗体结合，经辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，与酶底物反应染色，在492nm测定与VEGF浓度相对应的OD值。以标准品的OD值画出标准曲线，根据样品OD值在该曲线图上查出相应的VEGF含量。

1.2.3 肿瘤组织VEGF检测肿瘤组织经常规固定、石蜡包埋、切片后，采用Envision二步法染色。一抗采用鼠抗人VEGF单克隆抗体。肿瘤组织VEGF以肿瘤细胞胞质内出现棕黄色颗粒为阳性。VEGF判断标准：（-）为无瘤细胞着色，（）为着色瘤细胞数＞10%。

1.2.4 统计学方法用SPSS11.0软件做统计分析，P＜0.05为差异有显著性。

2 结果

2.1 围手术期血清VEGF水平比较围手术期两组血清VEGF水平见表1。从表1可见，术前肿瘤组血清VEGF水平虽高于对照组，但差异无显著性（P＞0.05）。术后两组血清VEGF均较术前明显升高（P＜0.05）。肿瘤组术后血清VEGF较对照组明显增加，两组差异有显著性（P＜0.05）。

表1 围手术期血清VEGF水平比较（x±s，μg/L）

2.2 肿瘤组术前血清VEGF与肿瘤临床病理参数的关系肿瘤组术前血清VEGF与肿瘤临床病理参数的关系见表2。从表2可见，肿瘤组织细胞中的VEGF表达阳性患者的血清VEGF水平虽高于表达阴性者，但差异无显著性（P＞0.05）；有淋巴结转移的患者血清VEGF水平显著高于无淋巴结转移者（P=0.003）；肿瘤侵犯浆膜的患者血清VEGF水平显著高于浆膜未受累者（P=0.037）；临床分期为Ⅲ和Ⅳ期患者血清VEGF水平显著高于Ⅰ和Ⅱ期者（P=0.029）。