海带硫酸多糖对小鼠腹腔巨噬细胞的免疫调节作

2014-12-12 01:41

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海带硫酸多糖对小鼠腹腔巨噬细胞的免疫调节作用

作者:宋剑秋　徐誉泰　张华坤　张可炜　徐中平　王海仁

关键词：海带硫酸多糖巨噬细胞免疫调节

　　近年来人们发现某些藻类多糖具有明显的抗肿瘤作用［1］。我们从海带中提取了一种天然生物大分子海带多糖(Laminarin sulfate,LAS),由L-岩藻糖、D- 半乳糖等糖基组成的硫酸酯化多聚物,平均分子量为1.5×105。该多糖对小鼠肉瘤S180的抑制率可达86.5%。本研究初步观察了LAS对小鼠腹腔巨噬细胞(Peritoneal macrophages,PMΦ)的激活作用,以探讨其抑瘤作用机理。

　　1　材料与方法

　　1.1　材料　昆明种小鼠,性别不限,18～ 22 g,由山东省实验动物中心提供; 雄性Balb/c小鼠,由山东医科大学提供。LAS为本室产品;RPMI1640培养基为GIBCO产品;3H-TdR由中国原子能研究所提供。

　　1.2　方法

　　1.2.1　PMΦ的体内激活及活性测定

　　1.2.1.1　PMΦ的体内激活与收集　小鼠腹腔注射LAS 0.2 ml后第3天无菌条件下取腹腔渗出细胞调整细胞浓度为1.0×106 ml-1,分别向无菌24孔及96孔培养板内加入细胞悬液1.0、0.1 ml,每样本均设3个复孔,并设空白对照孔, 置37 ℃,5%CO2培养箱内孵育2 h，收集未粘附细胞并计数,培养板内为PMΦ单层。

　　1.2.1.2　PMΦ过氧化物酶活性的测定　参照文献［2］方法进行。

　　1.2.1.3　PMΦ吞噬功能的测定　参照文献［3］方法进行。

　　1.2.1.4　PMΦ细胞毒性测定　参照文献［4］方法进行。

　　1.2.2　PMΦ IL-1的诱生及活性测定　参照文献［5］进行。