电针和半夏泻心汤对功能性消化不良大鼠胃动素

功能性消化不良（functional dyspepsia，FD）是慢性持续或反复发作的上腹痛或不适、腹胀、嗳气、早饱、厌食、恶心、呕吐、烧心、胸骨后隐痛或反胃等，病程超过12周以上，经各项检查排除器质性疾病的一组消化内科的临床症候群［1］。现代医学多采用促动力药、质子泵抑制剂、粘膜保护剂和抗抑郁剂等药物治疗［2］，中医药多施以针灸和调理脾胃的方药，如调和脾胃之代表方剂半夏泻心汤。本研究观察了电针和半夏泻心汤单用及合用对FD模型大鼠血浆、胃窦及下丘脑组织中胃动素（motilin，MTL）含量的影响，现报道如下。
    1  材料与方法

    1.1  动物与分组

    健康成年SD大鼠，共60只，体质量为180～250g，雌雄不拘，由安徽省全椒安立实验动物有限公司提供，实验动物生产许可证：SCXK（苏）2002-0002。大鼠随机分为6组，每组10只，即正常对照组（常规饲养，未作任何处理）、模型组（夹尾刺激处理造模）、西药组（造模后给予2.82g·kg-1· d-1枸橼酸莫沙必利水溶液灌胃治疗，连续7 d）、电针组（造模后给予电针治疗）、中药组（造模后给予中药灌胃治疗）、电针加中药组（造模后给予电针及中药灌胃治疗）。

    1.2  药品与仪器

    氨基甲酸乙酯（乌拉坦），批号960101，由上海化学试剂采购供应站提供；PCE程控电针治疗仪，由安徽中医学院针灸经络研究所研制；MTL放免药盒，由解放军总医院科技开发中心放免所（原北京东亚免疫技术研究所）提供。

    1.3  FD模型复制

    参照文献［3］介绍的方法，采用夹尾刺激引发大鼠打斗。结果大鼠出现紧张、焦虑反应，进食量明显减少，毛色变暗、枯黄、不顺，与上述文献报道基本一致，说明造模成功。

    1.4  中药制备

    半夏泻心汤水煎剂所用中药购自安徽中医学院第一附属医院中药房，经安徽中医学院药学院中药教研室鉴定，均为正品。生药剂量比例按原方根据文献［4］方法换算，取人用剂量（3.3g/kg）的10倍。药物以蒸馏水煎煮30min，提取2次，合并煎液并过滤，水浴加热蒸发浓缩为1g/mL，贮于冰箱中备用。造模后以33g·kg-1·d-1剂量开始给药，每日1次灌胃，连续7 d。

    1.5  电针处理

    造模后，将大鼠放置于特制的固定器内，动物保持清醒安静状态，根据"大鼠穴位图谱"（江苏省中医药研究所华兴帮研究员等用模拟骨度法绘制而成），选取大鼠双侧"足三里"穴（ST36）为针刺穴位。实验开始时将大鼠左右后肢膝关节外下方（即腓骨小头下方）体毛除去，确定穴位（腓骨小头下方5mm处）后用苦味酸作标记，1寸毫针刺入。以电针仪给予电刺激，频率为20～100 Hz的疏密波混频刺激，输出电压4～6 V，以大鼠下肢轻微颤抖为度，持续电针20min，每日1次，连续7 d。

    1.6  取材

    禁食24 h，取材前用氨基甲酸乙酯（乌拉坦）1.0g·kg-1腹腔注射麻醉大鼠后，进行标本采集。

    广州中医药大学学报2007年第24卷第5期方正清，等.电针和半夏泻心汤对功能性消化不良大鼠胃动素的影响1.6.1  血液采集  打开腹腔，由腹主动脉采血；取血1.5 mL置于含100g/L乙二胺四乙酸二钠（EDTA-2Na）30μL和抑肽酶30μL试管中混匀，室温放置20min，4℃、3 500r/min离心20min，取血浆-20℃保存，用于测定血浆MTL的含量。

    1.6.2  胃、肠组织采集  取近幽门部胃窦组织，用电子天平迅速称质量后以m胃组织：V生理盐水=1∶5的比例放入煮沸的生理盐水中继续煮沸3min，加入1mol/L冰醋酸0.5mL于匀浆器中制成匀浆，放置1～2h，再用相应体积的1mol/L NaHCO3中和，4℃、3 000r/min离心30min，取上清液，-20℃保存，用于测定胃窦组织中MTL的含量。取空肠起始段近端肠组织，迅速称质量后制成匀浆（方法同胃窦组织），4℃、3 000r/min离心30min，取上清液，-20℃保存，用于测定肠组织中MTL的含量。

    1.6.3  脑组织采集  快速剥离大鼠脑组织，按照文献［5］所标记的相应位置，在冰盘上切取大鼠下丘脑，迅速称质量后制成匀浆（方法同胃窦组织），于4℃、3 000r/min离心30min，取上清液，-20℃保存，用于测定下丘脑组织中MTL含量。

    1.7  检测方法

    采用放射免疫法检测，严格按照试剂盒说明书方法进行。

    1.8  统计学处理

    采用SPSS for Windows 11.0软件分析。

    2   结果

    表1结果显示，模型组血浆、胃窦组织、空肠组织、下丘脑组织中的MTL含量下降，与正常对照组比较，差异有显著性意义（P＜0.05或P＜0.01）；各治疗组与模型组比较，血浆、胃窦组织、空肠组织及下丘脑组织MTL含量均显著性升高（P＜0.01）；电针组胃窦组织MTL含量及电针组、中药组下丘脑组织MTL含量与电针加中药组比较，差异均有显著性意义（P＜0.01）。

    3  讨论