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志贺菌敏感株与诱导耐多药株蛋白质组学分析(2)

2013-07-13 01:01 n) 在志贺菌诱导耐多株中表达量上调，表明虽然ABC转运蛋白也存在于志贺菌敏感株中，但在志贺菌诱导耐多药株中表达量明显增加，将结构不同药物泵出胞外，导致胞内药物达不到有效浓度而导致细菌耐多药，可见此蛋白在志贺菌的耐多药机制中也起重要作用。本文结果还显示，200号谷胺酰转肽酶（γ-glutamyltranspeptidase,γ-GTP）表达量增加，提示在长期低浓度药物诱导作用下，转肽酶参与的生物代谢反应中形成的一些生物介质可能在诱导耐多药过程中起重要作用，从而使此酶的表达量增加，以满足细胞在应急条件下生存所必需。从双向电泳图谱来看，201号天冬氨酸氨甲酰基转移酶在诱导耐多药株中明显发生位移，分子量及等电点均增加，表达量也有所提高，推测在药物诱导过程中，该酶可能发生某些基团的修饰作用，以适应新而生存。2006年，Tian-Yi Ying等〔12〕对福氏2a志贺菌2457T的外膜免疫性蛋白质进行双向电泳肽指纹图谱分析及蛋白印迹法检测，发现翻译延长因子Tu（Protein chain elongation factor ，EF-Tu）是志贺菌的外膜抗原蛋白。本次结果表明，14号EF-Tu在志贺菌的诱导耐多药株中表达量降低，可能是其基因调控序列在长期药物诱导过程中发生变异，使产物的表达量降低，或可能另一类能调节EF-Tu的翻译延长因子Ts表达量降低，从而使EF-Tu活性降低，以适应细胞在不利环境环境中生存。72号单链DNA结合蛋白 (SSB) 在敏感株向耐多药株转变过程中表达量也有所下降。本文从全蛋白组角度探讨了志贺菌的耐多药机制，选择志贺菌敏感株作为实验菌株，通过药物诱导产生诱导耐多药株，排除了因菌株不同而导致的差异，可比性好。后续研究可能会发现更多与志贺菌耐多药的相关蛋白，从而为志贺菌耐多药分子机制及新型抗菌药物开发研制提供基础资料。

 

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  　　〔1〕 苏林光,贾杰,潘光华.次抑菌浓度的药物诱导细菌耐药与交叉耐药［J］.中国抗生素杂志,1997,22(4):301-303.

　　〔2〕 贾继辉,于修平,郭辉玉,等.幽门螺杆菌蛋白质组双向电泳图谱的构建及其相关技术体系的建立［J］.山东大学学报：版,2003,41(3):225-227.

　　〔3〕 Marshak DR,Kadonagaj T,Burgess RR ,et al.蛋白质纯化与鉴定实验指南［M］//朱厚础,译.北京:科学出版社,2000：158- 159.

　　〔4〕 Berkelman T,Stenstedt T.2-D electrophoresis using immobilized pH gradients:principles & Methods［M］.Amersham Pharmacia Biotech Inc Press,1998：36.

　　〔5〕 Neuhoff V,Arold N,Taube D,et al.Improved staining of proteins in polyacrylamide gels including isoelectric focusing gels with clear background at nanogram sensitivity using Coomassie Brilliant Blue G-250 and R-250［J］.Electrophoresis,1998,9:255-262.

　　〔6〕 Shevchenko A ,Wilm M,Vorm O,et al.Mass spectrometric sequencing of proteins Sil-stained polyacrylamide.gels［J］.Anal Chem,1996,68:850-858.

　　〔7〕 Johnstone RW,Ruefli AA,Smyth MJ.Multiple physiological functions for multidrug transporter P-glycoprotein［J］.Trends Biochem Sci，2000，25(1):1-6.

　　〔8〕 Kim RB.Transporters and xenobiotic disposition［J］.Toxicology,2002,181:291-297.

　　〔9〕 陈川,王三英,彭宣宪.嗜水气单胞菌耐四环素的白质组学初步研究［J］.微生物学报,2004,44(3):396-398.

　　〔10〕 Loiseau PM,Bories C.Mechanisms of drug action and drug resistance in leishmania as basis for therapeutic target identification and design of antileishmanial modulators［J］.Curr Top Med Chem，2006，6(5):539-550.

　　〔11〕 Sipos G,Kuchler K.Fungal ATP-binding cassette (ABC) transporters in drug resistance & detoxification［J］.Curr Drug Targets，2006,7(4):471-481.

　　〔12〕 Tian-Yi Ying,Jun-Jun Wang,Heng-Liang Wang,et al.Immunoproteomics of membrane proteins of Shigella flexneri 2a 2457T World ［J］.J Gastroenterol,2005,11(43):6880-6883.