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【关键词】 富硒板党
恩施板桥党参(简称板党)为桔梗科党参属植物的干燥根,因生长在湖北恩施板桥镇而得名,为我国名贵材,也是非常好的滋补品〔1〕。其根含有丰富的多糖、甾醇、甾酮、苷类、氨基酸、胆碱及微量元素如硒等,对中枢神经系统、心血管系统、消化系统、免疫系统、血液和造血系统都有重要改善作用,是益气补脾的上乘良药〔2〕。现代研究认为,中枢神经系统功能退变是人体衰老的关键,并与代谢产生的氧自由基慢性损伤或抗氧化酶不足密切相关。本试验用富硒板党注射液腹腔注射,通过对大鼠行为学观察和组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH睵x)含量测定,探讨富硒板党注射液对大鼠学记忆能力及抗氧化酶的影响,进一步探讨其改善中枢神经系统功能的作用机制。
1 与方法
11 党参注射液制备
富硒板党[恩施板桥乡中药材生产质量规范(GAP)示范基地]。采用水提醇沉法制成含生药30%的注射液,瓶装密封消毒备用。用双道束原子荧光光谱法测定硒的含量为072?μg/ml。
12 药品及实验仪器
氟哌啶醇注射液(湖南洞庭药业股份有限公司);SOD、GSH睵x试剂盒(南京建成生物工程研究所);回避反应箱(华中科技大学同济医学院自制);GL20G II型高速低温离心机,UV2450分光光度仪,水浴箱。
13 大鼠电跳台行为学训练及测试
跳台实验参照文献〔3〕进行。末次给药15?min后将大鼠轻放于回避反应箱内训练,适应3?min,随后底部铜栅通电(36V)2?s,训练时间为3?min。24?h后再进行行为学测试,记录各鼠第一次跳下平台的潜伏期和3?min跳下平台的错误次数。
14 实验动物分组
雄性Wistar大鼠50只,鼠龄40~50周,体重300~350?g(华中科技大学同济医学院动物中心),随机分为对照组、模型组、富硒板党高剂量组、中剂量组和低剂量组,每组10只。模型组按1?g/(kg·bw)腹腔注射氟哌啶醇注射液,富硒板党高、中、低剂量组分别在注射氟哌啶醇的同时,按72,36,18?g/(kg·bw)腹腔注射富硒板党注射液,对照组每天等量腹腔注射生理盐水,各组用药为2次/d注射,连续用药7?d。实验动物造模参照文献〔4〕。
15 SOD、GSH睵x测定
行为学测试结束后断颈处死大鼠,迅速取血及各种组织,血液离心取血清,组织制成10%匀浆,备用。SOD、GSH睵x测定,按试剂盒说明书进行,蛋白定量采用双缩脲法测定。
16 分析
采用SPSS115统计软件进行方差分析(ANOVA),计量资料用均数加减标准差表示,对不符合ANOVA的数据,用非参数(Kruskai瞁allis Test)进行比较分析。
2 结果
21 富硒板党对大鼠学习记忆能力的影响
富硒板党各剂量组与模型组比较均能延长实验大鼠的跳台潜伏时间,减少3?min犯错次数,高、中剂量尤其明显(P<001),提示富硒板党能维持实验大鼠学习记忆能力,见表1。表1 富硒板党对大鼠学习记忆能力的影响(略)注:与模型组比较,*P<001,**P<005
22 富硒板党对大鼠血及组织SOD、GSH睵x影响
富硒板党注射液各剂量组与模型组比较均能提高血液、海马、脑皮质及肝肾SOD、GSH睵x表达值,高、中剂量组作用明显(P<001),见表2,3。表2 富硒板党对大鼠血及组织SOD的影响(略) 注:与模型组比较,*P<001,**P<005表3 富硒板党对大鼠血及组织GSH-Px的影响(略)注:与模型组比较,*P<0.01,**P<0.05
3 讨 论
多者认为,体内自由基的浓度与学习记忆功能密切相关,随着年龄的增加,由于抗氧化酶活性不断下降,体内产生的过量氧自由基无法及时清除,造成细胞代谢和功能形态的改变,导致细胞的衰老。SOD和GSH-Px是重要的抗氧化酶系,能清除氧自由基、降低细胞内H2O2水平、减少自由基和过氧化物蓄积导致的细胞毒性作用〔5〕。肖本见等研究表明,富硒板党能减弱苯异丙腺苷致小鼠学习记忆障碍,对小鼠具有益智和抗氧化作用〔6〕。本实验结果表明,富硒板党能减弱氟哌啶醇致大鼠的学习记忆障碍,维持实验大鼠学习记忆能力,显著提高实验大鼠血、肝、肾、海马、脑皮质SOD、GSH睵x的表达量,与肖本见等〔6〕的研究一致,说明富硒板党具有清除氧自由基、改善记忆抗衰老、老年性痴呆等作用。其作用机制可能与富硒板党所含胆碱、多糖及微量元素硒有关。为进一步开发及其应用、健康等方面提供了学实验依据。
【参考文献】