大口静灰球生药学研究论文

　    【摘要】  目的对大口静灰球进行生药学研究，建立其质量控制标准。 方法采用性状鉴别、显微鉴别的方法;利用高效液相色谱法测定麦角甾醇含量，对大口静灰球进行生药学初步研究。结果建立了大口静灰球的性状、显微鉴别方法，制定了麦角甾醇的含量测定方法与指标，其样品平均加样回收率为100.48%，RSD为1.26%。结论此实验建立的大口静灰球的性状鉴别、显微鉴别及含量测定方法操作简便，专属性强，可用于大口静灰球的质量控制。

　    【关键词】  大口静灰球; 生药学; 含量测定

　     马勃为常用中药，具有消肿、止血、解毒等功效，用于咽喉肿痛及各种出血[1] 。《中国药典》(2005年版)规定大马勃Calvatia gigantea (Batsch ex Pers.)Lloyd.，紫色马勃Calvatia lilacina (Mont. et Berk.) Lloyd和脱皮马勃Lasiosphaera fenzlii Reich.为中药马勃的来源。全国很多地区也用大口静灰球 Bovistella sinensis Lloyd.子实体作马勃入药。大口静灰球菌别名叫中国静灰球，来源于马勃科静灰球菌属。分布地区主要是河北、河南、山东、吉林、江苏、广东、陕西、甘肃、西藏和贵州等。有止血、解毒、清肺、消肿、利喉等作用，可治疗咳嗽、咽喉肿痛、扁桃体炎、外伤出血。含亮氨酸 、酪氨酸、尿素、麦角甾醇、类脂质、马勃素及磷酸钠等。本实验对大口静灰球进行生药学研究。

　　1 材料与仪器

　　1.1 药材 试验用大口静灰球干燥子实体Bovistella sinensis Lloyd 购于吉林省仙草药材公司，麦角甾醇对照品购自中国药品生物制品检定所。

　　1.2 药品和试剂乙醇、石油醚、水合氯醛(分析纯)、甲醇(色谱纯)、纯净水、蒸馏水。

　　1.3 仪器 Agilent 1100高效液相色谱仪(广州北锐精密仪器有限公司);METTLE TOLEDO型电子天平(瑞士梅特勒-托立多公司);XS-213型生物显微镜。

　　2 方法与结果

　　2.1 大口静灰球性状鉴别子实体陀螺形至近球形，直径6～12cm。不孕基部小，外包被浅青褐色至浅烟色，薄，粉粒状，易脱落。内包被膜质，柔软，浅灰绿色，具光泽，成熟后上部不规则开裂成大口。孢体浅烟色。海绵状，具弹性[2] (图1)。图1 大口静灰球

　　2.2 大口静灰球的显微鉴别

　　2.2.1 大口静灰球临时装片的制备将适量大口静灰球研碎成粉末，取极少量粉末涂于载玻片上，滴加2滴水合氯醛，轻轻盖上盖玻片，避免产生气泡，制成临时装片。

　　2.2.2 大口静灰球的显微鉴别[3~5] 将大口静灰球粉末临时装片置于显微镜下，观察，找出大口静灰球粉末的典型特征。

　　2.2.3 实验结果孢子球形，黄褐色 ，光滑或具不明显小疣，直径4.5～5.5 μm。具无色透明小柄，长5～12.5 μm。孢丝褐色，稍有分枝，直径2.5～6 μm。见图2~3。图2 孢子(10×40) 图3 孢丝(10×40)

　　2.3 高效液相色谱法测定大口静灰球子实体中麦角甾醇含量

　　2.3.1 对照品溶液的制备精密称取麦角甾醇对照品5 mg，置于5 ml量瓶中，加甲醇溶解，定容，即得。

　　2.3.2 供试品溶液的制备麦角甾醇样品的制备：精称大口静灰球子实体4 g，石油醚(60～90℃)索氏提取6 h，提取物水浴蒸干，乙醇溶解并定容至10 ml，即得样品液。

　　2.3.3 色谱条件色谱柱为Diamond OSD(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为甲醇;检测波长282 nm;柱温25℃;理论塔板数按麦角甾醇计不低于3 000。

　　2.3.4 方法学考察