猪脑提取物对阿尔茨海默病大鼠学习记忆的保护(2)

　　3.1 Y-迷宫分辨学习能力检测实验各组手术前和手术后不同阶段迷宫试验学习记忆成绩见表1~2。对照组与假损伤组相比，其训练及测验的错误的次数明显高于假损伤组，学习记忆成绩差异显著(P<0.01)，说明海马CA1区注射喹啉酸可形成痴呆模型。中剂量组、及预防给药组大鼠给药10，20，30 d后，其训练及测验的错误的次数低于模型对照组(P<0.05或P<0.01)。

　　3.2 被动回避性跳台试验各组大鼠手术前和手术后被动回避性跳台实验结果见表3～4。术后对照组大鼠与假损伤组大鼠相比，其训练及测验的错误的次数明显高于假损伤组(P<0.05或P<0.01)。给药10 d后，多数组与模型对照组相比有统计学差异;给药20，30 d给药各组均能提高痴呆大鼠记忆能力，与模型对照组相比差异显著(P<0.05或P<0.01)，有一定的剂量依赖性。预防给药组疗效较好。表1 猪脑提取物对痴呆大鼠Y-迷宫分辨学习的影响　表2 猪脑提取物对痴呆大鼠Y-迷宫分辨学习的影响　表3 猪脑提取物对痴呆大鼠被动回避性跳台实验的影响表4 猪脑提取物对痴呆大鼠被动回避性跳台实验的影响　　3.3 生化指标MDA、NO、NOS的检测各组大鼠大脑皮质MDA，海马的NO、NOS的测定结果见表5。对照组大鼠与假损伤组大鼠相比，MDA、NO、NOS显著增高(P<0.05或P<0.01)，猪脑提取物能剂量依赖性降低痴呆大鼠大脑皮质MDA，海马NO含量和NOS活性(P<0.05或P<0.01)表5 猪脑提取物对痴呆大鼠大脑皮质MDA、海马NO含量及NOS活性的作用

　　4 讨论

　　国内外大量文献报道了有关神经生长因子、脑源性神经生长因子、神经营养因子等神经营养素家族能促进中枢和外周神经细胞的存活、生长和分化，在神经系统发育和正常生理功能的维持及恢复神经损伤中起着重要的作用[2～4]。目前，临床治疗脑卒中后遗症、脑外伤、老年性痴呆症等的脑功能退化性疾病多使用奥地利产脑活素[3]。由于进口脑活素需花费大量外汇，国内售价昂贵，加重了患者的经济负担。本文实验结果提示，猪脑提取物的制备方法简便，易于开发生产。

　　在痴呆大鼠模型选择上，选用了大鼠双侧海马CA1区注射喹啉酸(QA)造成AD大鼠模型。QA注入海马后，本身不被代谢，作为兴奋性毒素缓慢蓄积，通过快速兴奋性毒性和与钙超负荷有关的延迟作用，导致局部细胞急性坏死，进而引起神经元慢性溃变。由于海马CA1区大量的锥体细胞变性坏死，NMDA受体遭到破坏，LTP不能形成，最终导致学习记忆功能障碍[8]。我们用QA损毁大鼠双侧海马CA1区造成痴呆模型的实验结果与文献报道一致。

　　为了观察肌肉注射猪脑提取物对喹啉酸所致AD大鼠的影响，采用Y-迷宫、大鼠跳台两种方法，进行为期30 d的动态观察。结果显示，术后用药10 d，大鼠学习记忆水平就有改善，术前预给药7 d的大鼠学习记忆水平显著改善，与模型对照组相比差异明显。给药20 d后各组大鼠的学习记忆水平均有改善，尤以中剂量及预防组疗效为佳。提示猪脑提取物对AD大鼠有一定的疗效。

　　为进一步探讨猪脑提取物抗痴呆大鼠的作用机制，我们观察了其对MDA、NO、NOS的影响。MDA是反映自由基的一个指标，研究提示自由基生成过多是形成AD的一个重要因素，兴奋性氨基酸释放和自由基生成又有内在因果关系[9]。本实验发现，模型组大鼠记忆能力下降，且大脑猪脑提取物含量增加，自由基水平升高，而猪脑提取物可降低大鼠MDA含量，说明猪脑提取物提高AD大鼠学习记忆能力与其降低脑自由基水平有关。

　　NO是近年发现的一种新信使物质，也是一种自由基。在中枢神经系统中，它介导了兴奋性神经传导，对海马、小脑等神经元上突触可塑性和神经网络的构建产生重要影响，与学习记忆关系密切。现已肯定，谷氨酸从突触前膜释放，作用于兴奋性氨基酸受体NMDA受体，NMDA受体被过度激活后，使Ca2+内流增多，胞内Ca2+超载，可激活NOS，NO生成增多，导致神经细胞损伤，抑制与学习记忆有关的长时程突触增强(LTP)的形成[9]。本实验中对照组大鼠海马NO、NOS明显高于假损伤组，而猪脑提取物剂量依赖性地降低痴呆大鼠的NO、NOS，与模型对照组相比差异显著(P<0.05，P<0.01)，说明猪脑提取物改善痴呆大鼠学习记忆能力的作用与其降低NO水平有关。

　　综上所述，猪脑提取物可改善喹啉酸所致AD大鼠学习记忆能力，其作用机制与其降低大鼠大脑MDA、NO含量和NOS活性有关。本研究为抗痴呆药物开发和临床应用的奠定了一定基础。

【参考文献】