一种新型海洋来源的蒽环类化合物D19抗肿瘤活性(3)

　　为进一步明确D19导致人乳腺癌细胞MCF-7凋亡的分子机制，本文以时间梯度收MCF-7的总蛋白做Western Blotting。随着处理时间逐渐增加，caspase-9和PARP的前体逐渐减少，切割体逐渐增加(见图6)。α-Tubulin作为内参。结果显示，D19作用后的MCF-7细胞通过激活caspase诱导细胞凋亡。[PSa6696;S*2〗图6D19作用后人乳腺癌细胞MCF-7中caspase 9和PARP的表达水平变化Figure 6Time-dependent effect of D19 on caspase 9 and PARP in MCF-7

　　4讨论

　　肿瘤的化疗、放疗及生物学疗法是治疗肿瘤的重要手段，这些手段的主要机制在于利用化学药物、放射线或免疫制剂诱导肿瘤细胞发生凋亡。近年来研究一些抗肿瘤药物的作用机制时，除了研究其对DNA等大分子化合物合成及其结构的影响外[8]，还研究其对细胞凋亡的影响，发现抗代谢药物中的甲氨蝶呤、5-氟尿嘧啶、阿糖胞苷、Topo-I酶抑制剂喜树碱、Topo-II酶抑制剂鬼臼乙叉甙、阿霉素，以及顺铂、三尖杉酯碱、紫外线及γ-射线等，均可诱导细胞凋亡。因此认为细胞凋亡对肿瘤发生发展起着重要作用。如果对凋亡与抗肿瘤药物之间的关系进行深入研究，有可能改善目前肿瘤临床药物治疗的效果。

　　海洋作为一种特殊的生长环境(高盐、高压、缺氧、缺少阳光等)，使海洋生物能够产生并积累大量化学结构、生理活性与功能均十分特殊的物质，为此提供了一个丰富的新颖结构的化合物库 [9-12]。蒽环类化合物以阿霉素、表阿霉素为代表，具有抗肿瘤的生物活性[13-14]。本研究结果表明，从南海海洋共生微生物的次生代谢产物中筛选到的D19，具有蒽环类化合物的基本骨架。在体外实验中对人乳腺癌细胞表现出明显的抗肿瘤活性。值得注意的是，其对低分化、高侵袭性的乳腺癌细胞 MDA-MB-435 抑制率最高(IC50= 4.01 μmol/L)，对低致瘤率、低转移的人乳腺癌 MCF-7 抑制率稍低(IC50=7.32 μmol/L)。提示D19抑制肿瘤细胞生长的分子机制中可能存在对恶性肿瘤特异性的靶点。

　　目前认为，诱导细胞凋亡主要有caspase依赖途径和非caspase依赖途径，而以caspase依赖途径为主，caspase激活有外源性和内源性两条途径[15-18]。为了探讨D19的抗肿瘤作用分子机制，用 TUNEL 染色法分析了D19引起的细胞变化，发现该化合物能有效诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡。同时Western Blotting结果显示D19作用后，乳腺癌细胞中的凋亡蛋白如caspase 9及下游的效应蛋白PARP都发生裂解，说明D19能够诱导细胞通过caspase依赖的细胞凋亡而发挥抗肿瘤的活性。这一结果为深入研究D19 抗肿瘤活性的分子机制提供了线索。

【参考文献】 （科教作文网 zw.nseac.com整理）

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