正交试验法优化香附总黄酮提取工艺论

　    【摘要】  目的优选香附总黄酮的提取工艺。方法 以乙醇体积分数、料液比、提取时间、提取次数为考察因素，以总黄酮含量为测定指标，采用正交试验优化香附总黄酮的最佳提取工艺。结果 香附总黄酮的最佳提取工艺为乙醇体积分数70%、料液比1∶15、提取时间45 min、提取次数为2次。结论 该提取工艺稳定，适合香附总黄酮的提取。

　    【关键词】  香附;总黄酮;正交试验;提取工艺

　    Abstract:ObjectiveTo optimize the extraction technology of total flavonoids from Cyperus Rotundus. Methods Orthogonal experiment was designed with the content of total flavonoids as index,and with ethanol concentration,the ratio of material and solvent,extracting time and frequency as factors.Results The optimal extraction technology was as follows：70% ethanol,the ratio of material to solvent of 1∶15,extracting for 45 min and 2 times.Conclusion The extraction technology is steady and suitable for extracting total flavonoids from Cyperus Rotundus.

　　Key words:Cyperus Rotundus; total flavonoids;orthogonal experiment; extraction technology

　　香附为莎草科多年生草本莎草(Cyperus rotundus L.) 的干燥根茎，性辛、微苦、微甘、平,归肝、三焦经，具有疏肝理气、调经止痛的功效[1]。香附主要含有挥发油、黄酮类化合物、三萜类化合物、甾醇类、生物碱、糖类、酚类等化学成分[2]。现有研究已证明黄酮类化合物在治疗冠心病、老年性痴呆、脑血栓、神经系统疾病等方面有显著效果，还具有抑菌、抗癌等作用，且无副作用，已开发出许多种药品和保健食品[3-5] 。已有的文献资料未见有关香附黄酮类物质提取工艺的研究报道，故本试验对香附总黄酮的提取工艺以及含量进行初步研究，为香附总黄酮的进一步研究开发提供资料。

　　1仪器与试药

　　1.1仪器

　　Agilent8453E型紫外-可见分光光度计(美国安捷伦公司);BP211D电子分析天平(德国Sartorius);KQ-500超声仪(昆明市超声仪器有限公司，功率500 W，频率40 kHZ);层析柱(2.5 cm×14 cm)。

　　1.2试药

　　香附药材购自安徽亳州药材市场，经湖北医药学院附属人民医院药学部雷龙副教授鉴定为莎草科植物(Cyperus rotundus L.) 的干燥根茎;芦丁对照品(批号：10080-200306)购自中国药品生物制品检定所;聚酰胺(30～60目，浙江省台州市路桥四甲生化塑料厂);水为重蒸水;其余试剂均为分析纯。

　　2方法与结果

　　2.1供试品溶液的制备

　　取香附粉末(过2号筛)3.0 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加石油醚(60~90 ℃)50 mL，超声提取30 min，弃去石油醚液，待样品中残留的石油醚全部挥去后，按实验要求加入不同体积乙醇(不同体积分数)超声提取不同时间、次数，放凉后滤过，滤液置80 ℃水浴锅上浓缩至适量。称取聚酰胺3 g，以样品溶液拌样后置80 ℃水浴锅上加热至无醇味，装入层析柱中。用蒸馏水100 mL、20%(体积分数)乙醇50 mL、60%(体积分数)乙醇300 mL依次进行洗脱，收集60%(体积分数)乙醇洗脱液，置水浴锅上浓缩，用60%(体积分数)乙醇定容至25 mL，即得。

　　2.2对照品溶液的制备

　　精密称取已干燥至恒重的芦丁对照品20.08 mg，置10 mL容量瓶中，加60%(体积分数)乙醇溶解至刻度，摇匀，即得。

　　2.3测定波长的选择