脑忆源胶囊中黄酮类物质含量测定论文(2)

　　2.2.1.1对照品溶液精密称取淫羊藿苷对照品，加甲醇溶解制成34.5μg/mL的溶液。

　　2.2.1.2供试品溶液取胶囊内容物，精密称取0.1g（批号：20080819），置具塞锥形瓶中，加体积分数80％乙醇25mL，称定质量，超声处理30min，再称定质量，用体积分数80％乙醇补足减失质量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

　　2.2.1.3阴性样品溶液取不含淫羊藿的阴性制剂样品，按2.1.2项下方法制备阴性样品溶液。

　　2.2.2检测波长的选择取按2.2.1项下方法制备的3种溶液，分别在200～600nm范围内进行波长扫描，结果显示对照品溶液和供试品溶液均在270nm处有最大吸收，阴性溶液在270nm处无吸收，结果见图1。

　　2.2.3色谱条件［8］色谱柱：Luna Cl8（2） 100R（150mm ×4.6mm，5μm），流动相：乙腈—水（体积比为30∶70），流速：1.0mL/min，检测波长：270nm。以淫羊藿苷计算理论塔板数不低于6000。

　　2.2.4专属性试验在上述色谱条件下，分别取对照品溶液、供试品溶液、阴性样品溶液10μL进样测定，记录色谱图，淫羊藿苷峰保留时间为5.89min，阴性样品在淫羊藿苷峰位置无干扰峰，供试品中淫羊藿苷与其他组分分离完全，分离度为2.09，理论板数以淫羊藿苷峰计算为6057，结果见图2。

　　2.2.5标准曲线绘制精密吸取对照品溶液2、4、6、8、10、12、14μL ，按2.2.3项下色谱条件测定，以峰面积为纵坐标，进样量为横坐标，进行线性回归，回归方程：Y=132307X-10726，r=0.9999，结果表明淫羊藿苷在6.9×10-2～4.83×10-1μg呈良好的线性关系。

　　2.2.6精密度试验精密吸取对照品溶液10μL，连续进样5次，测定淫羊藿苷峰面积，结果峰面积积分值sR为0.95%（N=5），表明精密度良好。

　　2.2.7重复性试验取同一批号样品（批号：20080819）5份，按供试品溶液制备方法制备，进样10μL测定，淫羊藿苷含量均值为3.96mg/粒，sR为2.7%，表明重复性良好。

　　2.2.8稳定性试验取2.2.1.2项下供试品溶液分别于0、4、8h进样，测定淫羊藿苷峰面积，结果峰面积积分值sR为0.59%（N=3），表明供试品溶液在8h内稳定。

　　2.2.9加样回收试验精密称取5份已知含量的样品（批号：20080819）约0.05g，精密加入淫羊藿苷对照品溶液1mL（0.49mg/mL），按2.2.1.2项下方法制备供试品溶液，进样10μL测定，计算回收率，结果见表3。表3淫羊藿苷加样回收率试验（略）

　　2.2.10样品测定精密称取3批样品各0.1g，按2.2.1.2项下方法制备供试品溶液，进样10μL，依法测定淫羊藿苷的峰面积，照外标一点法计算含量，结果见表4。表4脑忆源胶囊中淫羊藿苷含量测定（略）

　　3讨论

　　目前改善记忆功能的国产保健食品中含中药或植物药组方者较少，仅舒脑口服液和脑轻松胶囊涉及，功效成分为总黄酮，但其制剂总黄酮标示含量均在100mg/kg以下。本试验测得脑忆源胶囊中总黄酮含量达11440mg/kg，淫羊藿苷含量达8520mg/kg。按剂量服用，每天总黄酮摄入量可达到60mg左右，为产品的药效学研究奠定了辅助改善记忆功能的物质基础。总黄酮的含量测定方法报道很多，