谈北豆根提取物中有效成分分析方法的建立(2)
2013-12-11 01:16
导读：表2 蝙蝠葛碱的显色稳定性考察（略） 平均吸收度为０．４２３，RSD为０．０３％，表明吸收度在１２０ ｍｉｎ内没有明显变化。 ２．１．５ 标准曲线的
表2 蝙蝠葛碱的显色稳定性考察（略）
平均吸收度为０．４２３，RSD为０．０３％，表明吸收度在１２０ ｍｉｎ内没有明显变化。
２．１．５ 标准曲线的制备分别精密吸取对照品溶液０．３，０．５，０．８，１．０，１．２，１．５，２．０ ｍｌ，置１０ ｍｌ 容量瓶中，加入０．１％溴甲酚绿溶液０．２ ｍｌ，于６２０ ｎｍ 测定吸收度，随行试剂空白。以蝙蝠葛碱浓度C 对吸收度A 进行线性回归，得标准曲线方程：C ＝４９．９１A －０．８８，r ＝０．９９９ ８ （n ＝７），线性范围为６ ～４０ μｇ· ｍｌ－１ 。
２．１．６ 精密度实验取２．１．５ 中的样品（２０ μｇ· ｍｌ－１ ）测定吸收度，重复测定５ 次，平均吸收度为０．４２３，RSD 为０．１１％。
２．１．７ 加样回收率实验精密称取北豆根提取物２．０ ｍｇ（总碱含量以北豆根碱计为９２．７％），置１０ ｍｌ 容量瓶中，加无水甲醇使溶解，超声提取１５ ｍｉｎ，用无水甲醇定容至１０ ｍｌ，总碱浓度以蝙蝠葛碱计０．１８５ ｍｇ· ｍｌ－１ 。蝙蝠葛碱对照品溶液浓度为０．２ ｍｇ· ｍｌ－１ 。分别精密吸取两种溶液各０．４，０．５，０．６，０．８，１．０ ｍｌ，一一对应混合于１０ ｍｌ 容量瓶中，无水甲醇定容。测定结果见表３。
表3 TAMD的回收率（略）
２．２ 高效液相色谱法测定提取物中蝙蝠葛碱含量［３］
２．２．１ 色谱条件色谱柱：Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ －Ｃ１８ （５ μｍ，４．６ ｍｍ ×２５０ ｍｍ）；流动相：乙腈∶水∶磷酸＝１６∶８４∶０．１５（V∶V∶V）；流速：０．５ ｍｌ· ｍｉｎ－１；波长２０８ ｎｍ；柱温：室温；进样量２０ μｌ；理论塔板数２ ３００。
（转载自中国科教评价网http://www.nseac.com）
２．２．２ 北豆根对照品、提取物和药材的ＨＰＬＣ 的图谱见图１。
图1 北豆根对照品提取物和药材的HPLC图谱（略）
２．２．３ 标准曲线的绘制精密称取蝙蝠葛碱对照品（６０℃干燥至恒重）５．０ ｍｇ 置２５ ｍｌ 容量瓶中，用流动相溶解并定容，作为对照品溶液。分别精密吸取对照溶液０．５，１．０，１．５，２．０，３．０，４．０，５．０ ｍｌ 置１０ ｍｌ 容量瓶中，用流动相稀释至刻度，按上述条件进行检测，以峰面积（Y）对浓度（X）进行直线回归，得回归方程为：Y ＝１．５３ ×１０８ X ＋１．１８ ×１０４ ；r ＝０．９９９ ８ （n ＝７） ， 线性范围为０．０１ ～０．１ ｍｇ· ｍｌ－１ 。
２．２．４ 精密度实验选用“
