肺癌及癌旁组织EGR-1基因表达及与临床病理的关系(2)
2014-03-26 01:04
导读：1.2 试剂及方法 组织总RNA抽提试剂盒购于上海华舜 生物工程 有限公司，DL-2000Marker购于Takara公司，一步法RT-PCR试剂盒购于大连宝生物工程公司。肺癌组织及
1.2 试剂及方法 组织总RNA抽提试剂盒购于上海华舜
生物工程有限公司，DL-2000Marker购于Takara公司，一步法RT-PCR试剂盒购于大连宝生物工程公司。肺癌组织及癌旁组织为试验组，正常肺组织为对照组。应用RT-PCR测定EGR-1 mRNA表达：（1）细胞总RNA提取和鉴定：组织/细胞总RNA提取按试剂盒
说明书进行操作，紫外分光光度计测定RNA纯度及含量，各样本OD260/OD280均在1.7~2.0。（2）引物合成：根据参考文献提供的EGR-1、β-actin的cDNA序列［2］由北京赛百盛基因技术公司合成，纯化。引物序列如下：EGR-1 sense 5-TGC AGA TCT TGA CCC GTTC-3 Antisense 5-GGA GAT GGT GCT GAG GACG-3；产物长度：489bp；β-actin sense 5-CCA AGG CCA
