热盐水致大鼠萎缩性胃炎血清和胃黏膜组织SOD和(2)
2015-03-23 02:34
导读:1.2方法 实验开始随机宰杀4只作为空白“0 wk”对照. 其余大鼠分成对照组(control)20只、热盐水组(CAG)20只. 分别于4,8,12,24和32 wk各随机取4只,1
1.2方法
实验开始随机宰杀4只作为空白“0 wk”对照. 其余大鼠分成对照组(control)20只、热盐水组(CAG)20只. 分别于4,8,12,24和32 wk各随机取4只,10 g/L戊巴比妥钠溶液0.5 mL/kg ip麻醉,腹主动脉取血分离血清,同时摘取全胃组织,制成组织匀浆,分别测定血清和组织中SOD, TAC和总蛋白的含量. SOD测定采用改良的盐酸羟胺法,样品管取样品20 μL,非酶管用三蒸水代替,依次加入75 mmol/L,pH=10.2碳酸盐缓冲液2.0 mL,3 mL/L Triton X100 0.3 mL,1.2 mmol/L 盐酸羟胺0.5 mL,0.98 mmol/L NBT 0.1 mL,37℃水浴20 min,2.0 mL甲酸终止反应,560 nm比色. 总蛋白测定采用Lowrys法. TAC按照试剂盒中的步骤严格操作. 另取胃窦黏膜组织,从胃大弯至胃小弯连续切片,组织切片进行HE染色. 参照1994年美国休斯顿胃炎诊断分类标准及井冈山会议胃炎诊断分类标准对胃窦、胃体黏膜组织学各项指标进行评定,组织切片由专人采取盲法阅片.