牙本质涎磷蛋白G0代转基因小鼠的获得(2)
2015-05-15 01:30
导读：转基因阳性鼠. 反应条件： 95℃预变性5 min；94℃变性1 min，60℃退火1 min，72℃延伸3 min，35个循环；72℃延伸10 min. Southern杂交： 选PCR阳性者，各取DNA 30 μL（
转基因阳性鼠. 反应条件： 95℃预变性5 min；94℃变性1 min，60℃退火1 min，72℃延伸3 min，35个循环；72℃延伸10 min.
Southern杂交： 选PCR阳性者，各取DNA 30 μL（约15 μg），用EcoRI消化，电泳，变性，中和，转膜，紫外交联，即可行杂交，探针为以显微注射用DNA为模板、以P1、P2为引物所获得的DSPP cDNA片段.
G0代整合小鼠每只一笼饲养，后与C57小鼠配种，雌性1∶1，雄性1∶2. F1代整合小鼠每系取雄性： 雌性1∶1~3合笼，F2代即可行纯合子鉴定. 建系同时对小鼠进行大体观
