大青叶中靛玉红的超临界萃取工艺及含量测定
2015-06-04 02:32
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【关键词】 大青叶 SFE technology of indirubin from Daqingye and
【关键词】 大青叶
SFE technology of indirubin from Daqingye and content determination of indirubin
【Abstract】 AIM: To use HPLC for the content determination of indirubin in supercritical fluid extraction (SFE) material from Daqingye and to optimize the process of SFE. METHODS: Content of indirubin was used as index to evaluate the technologies based on orthogonal design, in which 4 factors considered were extraction temperature and pressure, separation temperature and pressure. A HPLC system was used to determine the content of indirubin. RESULTS: Optimal program was as follows: extraction temperature 50℃ and pressure 40 MPa, separation temperature 40℃ and pressure 8 MPa. The average recovery of indirubin was 102.8% and RSD was 1.48%. CONCLUSION: The extraction temperature, extraction pressure and separation pressure all have significant effects on the extraction rate of indirubin. The HPLC method is simple, precise and suitable for the content determination of indirubin in SFE material of Daqingye.
【Keywords】 Daqingye; SFECO2; indirubin; chromatography, high pressure liquid
【摘要】 目的： 建立用HPLC测定大青叶的超临界萃取物中靛玉红含量的方法，对萃取工艺进行优选. 方法： 采用超临界萃取法进行L9(34)正交实验. 以靛玉红含量考察萃取温度、萃取压力、分离温度及分离压力四个因素的影响. 采用HPLC法测定萃取物中靛玉红含量. 结果： 最佳萃取工艺为萃取温度50℃,萃取压力40 MPa,分离温度40℃及分离压力8 MPa. 靛玉红平均回收率为102.8%，RSD为1.48%. 结论： 萃取温度、萃取压力及分离压力对大青叶中靛玉红的萃取都有显著影响. HPLC法操作简便，结果准确，可作为超临界萃取大青叶中靛玉红的质量控制方法.
【关键词】 大青叶；CO2超临界萃取；靛玉红；色谱法，高压液相
0引言
靛玉红主要来源于植物马蓝(Baphicacanthus cusia)、蓼蓝(Polygonum tinctorium)及菘蓝(Isatis indigotica)的中药材如大青叶、板蓝根、青黛等，靛玉红是其主要有效成分. 靛玉红有治疗慢性髓性白血病作用，是一种应用前景广阔的抗肿瘤成分［1］.
本文来自中国科教评价网
靛玉红在中药材中含量很低，为减少药物使用量，提高生物利用度，我们用超临界流体萃取（SFE）法对大青叶中的靛玉红进行分离提纯，同时建立萃取物中靛玉红含量的HPLC测定方法，优化靛玉红SFE工艺.
1材料和方法
1.1材料Golden System高效液相色谱仪（美国Beckman公司），配125型高压双泵，168型二极管阵列检测器；色谱柱: Synersi FusionRP柱（4.6 mm×250 mm， 4 μm，美国Phenomenex公司）；FY2215006超临界萃取仪（南通市飞宇石油科技开发有限公司）；R200D电子分析天平（德国Satorius公司）；旋转蒸发仪（EYELA ASPIRATOR A3S RIKAKIKAT CO.LTD）. 大青叶购自西安药材市场，按照中国药典（2005年版）有关大青叶项下鉴定本品为合格药材；靛玉红对照品购自中国
药品生物制品检定所，批号717200204；甲醇为HPLC级（美国FISHER公司），水为超纯水，其余试剂均为AR级.
1.2方法
1.2.1SFE正交实验设计采用L9(34)设计，选择萃取温度、萃取压力、分离温度及分离压力四个因素，每个因素取3水平. 分别为萃取温度40, 50及60℃；萃取压力20, 30及40 MPa；分离温度30, 40及50℃；分离压力8, 10及12 MPa.
1.2.2供试品溶液的制备打开超临界萃取仪，按1.2.1的设计设置萃取仪温度参数，预热完毕后将精密称取的大青叶50 g放入萃取缸Ⅱ，按1.2.1的设计将压力值调整到需要的参数，同时向副泵系统下的夹带剂缸中加入氯仿100 mL，开动副泵，开始萃取. 每半小时收集一次分离液，至2 h内连续收集不到液体时停止该次实验. 将收集到的分离液在旋转蒸发仪上蒸干，用甲醇定容于10 mL容量瓶中，作为供试品溶液.
