1.引言 大量研究表明，运动减退（Hyperkinesias）(2)
2013-07-01 01:52
导读：2.4 数据采集与统计分析 采用 image-Pro Plus 6.0（Media Cybernetics）图象分析系统对各型肌纤维的细胞数进行定量分析。对各组动物的每一比目鱼肌组织各随机抽
2.4 数据采集与统计分析
采用 image-Pro Plus 6.0（Media Cybernetics）图象分析系统对各型肌纤维的细胞数进行定量分析。对各组动物的每一比目鱼肌组织各随机抽取1 张接近肌腹中部的切片，每张切片在20 倍光镜随机观察3 个视野，测定每个视野内各型肌纤维数，并计算各型肌纤维的构成比，求出每组动物的均值，使用spss13.0 软件对实验数据进行
统计学分析，所有实验数据均以平均数±标准差（mean±SE)表示，各组间的差异采用单因素方差分析．显著性水平取P<0.05。
3.研究结果
3.1 比目鱼肌湿重体重比
如所示，各组取出比目鱼肌称量其湿重，所得数据以100 g 体重标化，作为比目鱼肌湿重体重比。
实验测得大鼠比目鱼肌平均湿重体重比各组间比较：对照组湿重体重比（0.0529±0.0089）最高。振动组为0.0479±0.0088，自然恢复组为0.0460±0.0096。上述两组与对照组相比，无显著性差异（P>0.05）。上述两组与悬吊组（0.0326±0.0027）相比显著增加（P<0.05）。
3.2 各组大鼠比目鱼肌Ⅰ、Ⅱ型纤维构成比例
分别统计各组大鼠比目鱼肌的Ⅰ、Ⅱ型肌纤维数和纤维构成百分比进行对比。根据采用image-Pro Plus 6.0（Media Cybernetics）图象分析系统对各型肌纤维的细胞数进行定量分析，切片照片举例如下：根据测定每个视野内各型肌纤维数，并计算各型肌纤维的构成比，计算出每组动物的均值，各组比目鱼肌肌纤维类型百分比例比较见。
如表 2所示，各组大鼠比目鱼肌Ⅰ型肌纤维所占百分比从小到大依次为：悬吊组、自然恢复组、对照组、振动组。Ⅱ型肌纤维比例顺序则相反。与其他各组对比，悬吊组大鼠比目鱼肌Ⅰ型肌纤维所占比例减少为67.50%，Ⅱ型肌纤维所占比例增加为32.5%，有非常显著性意义（P<0.01）。说明悬吊形成的废用状态导致了肌纤维类型的由Ⅰ型向Ⅱ型方向转换。
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振动组（Ⅰ型89.73%、Ⅱ型10.27%）、对照组（Ⅰ型89.27%、Ⅱ型10.73%）、自然恢复组（Ⅰ型86.89%、Ⅱ型13.11%）各组之间相比无显著性差异（P>0.05）。表明本废用性肌萎缩模型经过振动刺激，Ⅰ型和Ⅱ型肌纤维之间的关系得到了恢复。
3.3 各组大鼠比目鱼肌Ⅱ型肌纤维类型的变化
前述实验结果可见，相对于对照组，悬吊后各组大鼠比目鱼肌的Ⅰ、Ⅱ型肌纤维均发生了不同程度的转化。因此本实验进而分别统计各组大鼠比目鱼肌的Ⅱ型肌纤维的亚型分类。
可见，振动组和悬吊组的Ⅱa 型肌纤维类型比例降低，Ⅱb 型肌纤维类型比例明显升高，与对照组和自然恢复组相比有非常显著性意义（P<0.01）。振动组中Ⅰ型纤维的比例没有下降，而Ⅱa 比例下降，说明振动刺激可能对抗了Ⅰ型纤维向Ⅱa 型纤维的转化。
3.4 各组大鼠比目鱼肌平均横截面积（CSA）
在 pH=9．4 的条件下 ATP 酶含量较少的Ⅰ型肌纤维mATP 酶染色呈阴性．而富含ATP酶的Ⅱ型肌纤维则呈强阳性，染色为深蓝色。可以用以计数肌纤维的平均横截面积。
各组大鼠比目鱼肌Ⅰ型肌纤维平均横截面积从小到大依次为：悬吊组、振动组、自然恢复组、对照组。Ⅱ型肌纤维平均横截面积顺序从小到大为：振动组、悬吊组、对照组、自然恢复组。其中，对照组、自然恢复组与悬吊组、振动组的Ⅰ、Ⅱ型肌纤维平均横截面积相比均有显著性意义（P<0.05）。悬吊组与振动组组间差别无显著性意义（P>0.05）。
提示废用性肌萎缩时比目鱼肌Ⅰ型、Ⅱ型肌纤维均发生了平均横截面积的减少，而振动刺激对Ⅰ型肌纤维的变化有一定的影响，但是结果没有显著性意义（P>0.05）。
4. 讨论和分析
废用状态下骨骼肌结构形态最直接的变化是肌肉萎缩，表现为肌肉重量和体积减少，且抗重力肌比非抗重力肌萎缩程度大，慢缩肌比快缩肌萎缩严重，且以骨骼肌湿重的改变最为显著，其下降幅度与废用时间及肌肉类型等密切相关；肌纤维直径（以平均横截面积计算）缩小；肌纤维类型也发生改变，表现为慢缩肌纤维（Ⅰ型肌纤维）数量减少而快缩肌纤维（Ⅱ型肌纤维）数量增加，但总的肌纤维数量不变，发生了Ⅰ型肌纤维向Ⅱ型肌纤维方向的转化；骨骼肌梭外肌纤维mATPase 活性明显升高，骨骼肌的显微结构与超微结构也发生了明显的变化。除上述指标外，还有神经-肌肉接点功能及电生理指标等的变化。
