自1929年英国细菌学家弗来明发现了第1个抗生素一(2)
2013-08-10 01:59
导读:3.5比色池清洁度的影响测定用的比色池应采用硫酸一硝酸(95:5)浸泡,并用蒸馏水冲洗干净。抗生素比浊法测量质量浓度一般为0.1~1 U/mL,而原始溶液
3.5比色池清洁度的影响测定用的比色池应采用硫酸一硝酸(95:5)浸泡,并用蒸馏水冲洗干净。抗生素比浊法测量质量浓度一般为0.1~1 U/mL,而原始溶液质量浓度为1 000 U/mL。在稀释过程中,所有试验物品一定要清洗干净,消毒灭菌,试验中一旦污染会导致被污染管浊度异常或造成同质量浓度抗生素管结果差异明显,可信限升高(可信限率(FL)%),可采用清水冲洗高质量浓度器具,采用专用洗刷池为宜,并与培养后的比色池或试管分开清洗,清洗时不得用毛刷,防止划痕。
3.6气泡的影响因素待加人各种所需物质后,将比色池物质充分混匀,采用WBS一100微生物比浊法测定仪,可自动间歇振摇,振摇时不得产生气泡,有气泡则干扰测定结果,此点尤为重要。
3.7微生物的污染(菌种不纯)在配制菌悬液时所用器皿必须严格高压灭菌,切忌使用未经灭菌的试管及物品进行试验,防止造成原始菌液的污染。另外,菌液的不纯也属于微生物污染,表明正常试验菌种被其他杂菌所污染,从而导致生物反应紊乱,导致细菌对抗生素的反应灵敏度降低,曲线不规则等现象。使精密度差,因此,在操作中要保持试验环境清洁,严防污染微生物,一旦被污染,可重新开启一支冻干菌种,从新传代,致使试验菌达到要求。
3.8时间的一致性在加入标准品和供试品溶液及含试验菌的培养基后,混合均匀,为防止培养基中的试验菌提前生长,必要时将培养基放置2~4℃冷却,适时取出加入菌液,此法可避免试验时加注时间过长和加入先后不同而造成误差,每个比色池的培养时间应一致。
3.9抗生素微生物比浊法展望随着抗生素微生物比浊法的出现,2012年兽药典将收载约10个抗生素品种采用比浊法测定效价,这将大大减少耗时和提高检测效率。随着检测技术的不断提高,抗生素微生物检定比浊法在菌液质量浓度和加菌量、抗生素质量浓度的稀释范围、培养基、缓冲液标准控制、培养时间、温度、样品和标准品质量浓度的制备、上机质量浓度范围、全程试验的环境条件及所用物品的灭菌要求,污物的处理等应制定出严格的规范和要求,是抗生素微生物检定比浊法的发展方向。
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