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| 全部作者： | 钟华平 赵伟 沈玲 薛蓉 吴引伟 殷艳天 |
| 第1作者单位： | 东南大学 |
| 摘要： | 目的 对采用实时荧光定量PCR（FQ-PCR）法检测外周血单个核细胞内（PBMC）HCVRNA含量过程中洗涤细胞的方法及标本保存的条件进行探索。方法分别于同1天内收集分离6例（A组）和11例（B组）血清HCVRNA阳性慢性丙型肝炎患者PBMC，A组分别采用常规法及改良法即在第2 次离心前加入10g/LRNA酶50μl处理15分钟洗涤细胞5次，并留取每次洗涤液及细胞；B组采用改良法洗涤细胞3次后并把细胞分成2份，分别作为新鲜组和-20℃冻存组，然后采用离心柱型RNA提取法和FQ-PCR检测洗涤液和细胞中HCVRNA含量。结果①洗涤完3次时，常规法有1份洗涤液HCV为阳性，改良法均为阴性；与第1次洗涤液相比，改良法再洗涤1次的病毒含量下降幅度明显高于常规法；②新鲜组与冻存组HCVRNA含量不存在明显差异，Spearman\\\'S相关系数为0.93，P＜0.01结论 洗涤PBMC以采用改良法洗涤3次为宜；-20℃简易冻存6周的PBMC标本仍可用于FQ-PCR检测。 |
| 关键词： | 实时荧光定量PCR; 外周血单个核细胞; 丙型肝炎病毒; 远程下载 (免费PDF全文) |
| 发表日期： | 2007年09月25日 |
| 同行评议： | 1.原文“affiliated with”应“affiliated to”。见牛津现代高级英汉辞典。2.原文“To explore that a method of ......”可为“To examine a methodof ......”。此实验方法在国内外已开展多年。3.原文“然而本实验并未出现这种现象，可能与离心参数不同、细胞内病毒含量低和样本量小等有关(见讨论第1节)”。建议：(1)在科技中尽可能不用“可能”2字；(2)本研究的样本量确实是小，能否增加1定的样本数量。 |
| 综合评价： |
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| 修改稿： | |
| 注：同行评议是由特聘的同行专家给出的评审意见，综合评价是综合专家对各要素的评议得出的数值，以1至5颗星显示。 | |