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低氧启动重组腺相关病毒的构建

2015-02-18 01:23
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毕业

全部作者: 李桂林 王任直 王欣 栗世方 窦万臣 张波 孔燕国
第1作者单位: 北京协和医院
摘要: 目的 构建低氧启动rAAV,介导目的基因仅在低氧时特异性高效表达。方法 通过分子生物学的方法,分别构建pGL3-6HRE-CMV-mp和pGL3-6HRE-CMV-mp-WPRE载体,比较2种低氧启动子的特异性和在低氧时的启动能力。选择最佳的低氧启动子构建低氧启动rAAV载体。采用磷酸钙和氯仿-PEG8000/NaCl-氯仿法构建低氧启动rAAV病毒。rAAV病毒蛋白电泳和EGFP报告基因验证低氧启动rAAV病毒的构建和介导目的基因在低氧时的表达。结果 6HRE-CMV-mp-WPRE是最佳的低氧启动子,在低氧时高效、特异的表达目的基因。低氧启动rAAV仅在低氧时介导报告基因EGFP的表达。采用6HRE-CMV-mp-WPRE启动子的rAAV具有良好的低氧特异性和高效启动能力。结论 采用最佳的低氧启动子,本研究实现了低氧启动rAAV的构建。
关键词: 重组腺相关病毒;低氧启动子 远程下载 (免费PDF全文)
发表日期: 2006年02月28日
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