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| 全部作者： | 龚剑峰 朱维铭 高翔 李宁 黎介寿 |
| 第1作者单位： | 南京军区南京总医院 全军普通外科研究所 |
| 摘要： | 目的：克隆MSI-1基因的启动子，并进行功能鉴定；方法：通过PCR介导重组的方法从小鼠基因组DNA中克隆MSI-1基因的5’侧翼片段。Northern Blotting检测MSI-1基因在体外细胞系的表达情况，选择转录分析的细胞平台。构建不同长度的5’末端缺失质粒，通过体外瞬时转染和荧光素酶活性测定检测这些5’末端缺失质粒的相对转录活性。结果：Colon26细胞系和B16细胞系均存在MSI-1基因的表达，但Colon26量更多。MSI-1基因转录起始位点下游73bp至转录起始位点上游4939bp的DNA序列的相对转录活性是pGL3-basic的29.9倍。讨论：pMSI+73~-4939具有驱动报告基因表达的活性，可以作为MSI-1基因的启动子。MSI-1基因转录起始位点上游4011bp至4939bp之间存在调节MSI-1基因表达的顺式作用元件，可能与MSI-1基因的组织特异性表达有关。MSI-1基因启动子的克隆将为应用该启动子进行肠道干细胞的分离和纯化提供了条件。 |
| 关键词： | 启动子 Musashi1基因 肠道干细胞 远程下载 (免费PDF全文) |
| 发表日期： | 2006年10月31日 |
| 同行评议： | （暂时没有） |
| 综合评价： | （暂时没有） |
| 修改稿： |