关于山药组织培养褐化反应的研究(2)

　　2.2不同外源物质对褐化的抑制作用

　　根据试验观察结果，加入3种外源物质在早期均能有效抑制外植体的褐化，但随着培养时间的延长，3种外源物质抑制褐化作用开始分化，C处理（MS+0.1%活性炭）最早发现外植体褐化，而且随着培养时间的再次延长，褐化现象越来越重，外植体基部培养基褐化块直径最大达到4cm；MS+80mg/L半胱氨酸组合在褐化抑制作用上较好于C处理，此次试验表现出最佳抑制效果的是A组合，即：MS+150mg/L聚乙烯吡咯烷酮(PVP)，其在培养早期发现只有2个样本有轻微褐化现象，而且随着培养时间的逐步增加，褐化程度表现也并不十分明显，仅仅在培养35d左右时，在外植体基部培养基出现了少量的褐化现象，而且褐化块的直径仅为0.8cm左右，各处理褐化抑制作用趋势见图1所示，组合B与组合C的发生褐化平均瓶数在同一培养时间段均高于组合A，同时组合A在培养20d至40d时间段出现褐化样本数增幅不大，所以图1组合A的抑制作用趋势图也较组合B与组合C平稳，因此组合A对样本褐化的抑制起到了较好的作用。

　　2.3不同培养基质对外植体褐化的影响

　　外植体褐化现象在固体基质培养与液体基质培养两种方式表现差别十分明显，根据试验结果，外植体的褐化程度在加了0.7%琼脂的固体培养基中表现明显大于液体培养基，在培养时间达到15d左右时，外植体基部的固体培养基均出现较明显的褐化现象，以外植体基部为中心，培养基褐化平均直径为1.5cm；培养时间逐步延长至30d，组培苗基部培养基褐化直径达到了4cm左右，部分组培苗出现轻度枯化现象。液体　

　　培养方式在培养时间达到30d时，未发现组培苗有明显的褐化现象，外植体生长状况良好，但培养时间达40d后，有少量外植体出现枯化现象，原因可能是因酚类物质氧化反应产生的有毒醌类物质在液体中容易被稀释，在短时间内无法在液体培养基中形成一个有效作用浓度点，所以外植体生长状况在一定时间内正常。外植体褐化率与培养时间在固体培养与液体培养之间的区别如图2所示，液体培养的外植体褐化率在30d后仅为3%左右，而固体培养褐化率在此时间段达到了50%，两种处理在图2表现出的走势有显著区别，液体培养方式比固体培养方式更适宜山组培苗的快繁。