关于山药组织培养褐化反应的研究(3)

　　3讨论

　　褐化是指植物组织培养过程中，由于外植体组织被切割和接种快繁时，损伤切面细胞中酚类物质（底物）在酚氧化酶的作用下与氧气聚合而发生氧化反应，形成有毒的醌类物质，外植体切面迅速变成棕褐色或暗褐色，并逐步扩散至培养基中，抑制其它酶的活性，导致组织代谢紊乱，生长受抑制，最终致使外植体死亡[5,9,10]。组织培养中抑制褐变方法目前已有大量的研究，如选择适宜的外植体、培养温度、PH值，培养时对外植体进行多次转移，在培养基中添加防褐剂（抗氧化剂），如抗坏血酸(Vc)、亚硫酸钠、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)等[4,6,11]。但在山组织培养中还鲜见相关抑制外植体褐化报道。研究表明，山药组织培养中不同外植体褐化程度也不同，山药植株后期结出的零余子褐化程度最严重，而其幼嫩节间部褐化程度最轻。在培养基中添加抗氧化剂均在一定时间内能有效抑制外植体的褐化，但山药外植体愈伤组织分化的时间大约为25d左右[2]，所以，只有MS+150mg/L聚乙烯吡咯烷酮(PVP)为最适宜配方。因山药组培苗快繁周期大约30d左右[2]，而液体基质培养方式正好在这一段时间内能使有毒醌类物质无法形成一个有效作用浓度点，因此，在山药组培苗的快繁阶段采用未加琼脂的液体培养基能有效其褐化，提高成活率。褐化是植物组织培养中较为普遍的现象，要从根本上解决这种褐化问题，需对褐化发生的原因、生理生化、遗传因素及植物品种等方面进行更深入的研究。

参考文献

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