BMP异位诱导成骨的Micro-CT评价(2)

　　bBMP (本研究所综合骨库制备)，昆明小鼠(第四军医大学实验动物中心提供)，速眠新(长春军事兽医研究所)，eXplore Locus SP型Micro-CT(美国GE公司), Micview V2.1.2 三维重建处理软件，ABA专用骨骼分析软件。

　　2.2 植入实验

　　(20±2) g昆明小鼠21只，麻醉后于双侧股部肌肉中植入bBMP各2 mg，分别于1、2、4、6、8、10、12周各处死3只，切取诱导分化组织，5%戊二醛固定。

　　2.3 标本扫描

　　扫描协仪： 44mltube21um150minss

　　扫描参数：扫描分辨率21μm，旋转角度360°，旋转角度增量0.4°，电压80 kV，电流80 μA，曝光时间3 000 ms，帧平均数为4，像素组合为1×1。

　　2.4 三维重建

　　扫描完成后，运用Micview V2.1.2软件进行三维重建处理。

　　2.5 分析测试

　　ABA专用骨骼分析软件分析测试以下参数：TMC，TMD，BVF，SMI，Tb.Th，Tb.N及皮质骨BMD。

　　2.6 统计学分析

　　测试数据表示为均数±标准差，用SPSS 10.0 统计软件处理，所有数据先行分布正态性分析和方差齐性检验，对多组均数的比较采用单因素方差分析，两组间比较采用t检验，P<0.05。

　　3 结果

　　3.1 MicroCT影像学

　　如图1(截取任一平面MicroCT扫描图)所示，除bBMP植入1周时尚无放射性显影外，从2周开始均有较强的放射线显影，诱导分化的组织呈椭圆状，从4周开始，椭圆形组织块内部显影的骨小梁数量逐渐减少。表面重建影像学结果见图2，2周和4周时，组织块表面呈疏松的蜂窝状， 6周开始至12周职称论文

　　3.2 分析测试结果

　　组织矿含量(TMC)测定结果显示，在2周到4周及10周到12周两个时间段，组织矿含量有一个加速增加的过程， 4周到8周趋于平稳而略有下降，8周到10周则缓慢上升(见图4A)，除10周与6周外，其他任何两组间比较均有显著统计学意义;组织骨密度(TMD)测定结果显示， 从2周到8周，TMD呈缓慢上升趋势，从8周开始到10周加速上升(见图4B)，除10周与12周外，其余各组间比较均有统计学意义;骨体积分数(BVF)总体呈现下降趋势(见图4C)，但变化不明显，两组间仅2周和12周比较具有统计学意义;结构模型指数(SMI)测定结果显示，2周到4周时间段，SMI下降，4周到6周，SMI上升，而从6周开始至12周，SMI持续下降(见图4D)，除2周与6周，4周与10和12周外，其余组间比较均有统计学意义;骨小梁厚度(Tb.Th)测定结果显示，2周到4周和10周到12周时间段，骨小梁厚度变化平稳，组间比较无统计学意义，从4周到10周呈加速变宽，组间比较均有显著统计学意义(见图4E);骨小梁数量(Tb.N)在4周时最大，且从此加速下降，至8周趋于平稳(见图4F)，除2周外，4周与其他各组比较均具有显著统计学意义，而6、8、10及12周两两比较均无统计学意义;皮质骨骨密度(BMD)测定结果显示，2周到8周，各组间比较无统计学意义，皮质骨骨密度无明显变化，从8周开始到10周时间段快速增加(见图4G)，2、4、6及8周与10和12周比较均有统计学意义。不同时间点各参数值见表1。

　　4 讨论