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2.1电泳结果不同产地和不同采收期的穿心莲种子蛋白的SDS-PAGE电泳结果见图1,根据此绘制的电泳图谱见图2。
结果显示,不同来源、同一产地不同采收期的穿心莲种子可溶性蛋白质电泳图谱共有11条共有特征带,且谱带清晰,Rf值分别为:0.460、0.471、0482、0.495、0.512、0.524、0.538、0.825、0.921、0937,表示其具有的共同遗传基础,可作为鉴定穿心莲种子的重要标记。以一级带、二级带作为主要分析特征,不同产地及不同采收期的穿心莲种子蛋白质谱带具有多条共同谱带,但广东省农科院白云基地采收种子的电泳谱带数目与其他种子有较大差异,有10条特征带。在三级带、四级带和五级带上,一些谱带的数目、迁移率有一定差异。
2.2 蛋白相对百分含量为了分析蛋白表达量,利用凝胶图像分析软件Band Scan对电泳蛋白图谱进行分析,其中由于有部分谱带的灰度值太低,难以测出其所在区域的蛋白含量。可测得的目的蛋白占总蛋白的百分数结果见表2。[PSa6121〗 a~f.分别是编号为a~f的穿心莲种子图1穿心莲种子可溶性蛋白电泳图谱[PSa6122;S*2〗图2穿心莲种子可溶性蛋白电泳图谱分析图结果表明,不同来源地和不同采收期的穿心莲种子蛋白表达量亦存在差异。
3讨论
穿心莲通常是种子繁殖,故种子的鉴定及其品质极为重要。蛋白质是基因表达产物,具有一定的稳定性,但亦会受环境的影响而发生基因的变异,形成不同的生态型甚至变种。本研究首次利用SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对广东省4个不同来源地的穿心莲种子及同一产地不同采收期的穿心莲种子水溶性蛋白进行了蛋白质电泳的初步研究。研究结果表明,SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳技术可作为鉴定穿心莲种子的生物指征。此外,同一来源不同采收期的穿心莲种子蛋白质电泳图谱在谱带数目、迁移率上具有较高相似性,在蛋白质相对含量上则呈现出一定的差异,提示可以作为穿心莲种子成熟以及最佳采收期的生化标记,相关的研究将在下一步工作开展。表2穿心莲种子可溶性蛋白电泳的蛋白表达量本研究表明了利用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对穿心莲种子进行鉴定及种子品质研究的可行性,为进一步研究穿心莲种质资源的保护、评价及育种提供参考依据。
【参考文献】 (科教作文网http://zw.ΝsΕAc.com发布)
[1] 张涛.穿心莲的研究进展[J].中药材,2000,23(6):366-368.