谈荧光法测定醛糖还原酶活性的优化论

摘要：目的 找出优化NADP生成荧光法测定红细胞醛糖还原酶 (AR) 活性的方案。方法 通过研究血红蛋白浓度、激发荧光水浴时间以及NADP溶液贮存时间对荧光强度的影响，优化红细胞AR活性测定的NADP生成法；以此方法测定正常及糖尿病大鼠AR活性。结果 NADP生成法的精确度受血红蛋白影响，在终止反应后的NADP溶液中加入250 μl 6％高氯酸沉淀血红蛋白可消除此影响；水浴激发荧光时间5、30、60 min，荧光值变异系数无差异；在激发荧光前将反应体系生成的NADP溶液贮存于-20℃的条件下至少可以稳定保存4 w。糖尿病大鼠AR活性明显高于正常对照组(P