论人乳铁蛋白对细胞增殖的影响论文

摘要: 目的 探讨人乳铁蛋白(hLF)对体外培养细胞生长特性的影响。方法 MTT法评定hLF对人鼻咽癌细胞、中国仓鼠卵巢细胞、人肝脏细胞的生长抑制作用。结果 乳铁蛋白对人鼻咽癌细胞系CNE的增殖有抑制作用并呈现剂量依赖性，对正常细胞无抑制作用。结论 hLF可能是一种效果较好的新的抗肿瘤化学剂。

关键词: 人乳铁蛋白;癌细胞;细胞增殖

　　人乳铁蛋白(Human Lactoferrin，hLF) 是主要存在于人乳清中的球蛋白，乳汁中特别是初乳中含量最高，具有广谱抗菌、抗病毒、抗肿瘤等作用〔1，2〕。国外有学者将其应用于肿瘤患者的治疗〔3〕，但是对其作用机制的研究较少。目前国内较少有关于hLF作用于细胞的报道，我们选用易早期转移的鼻咽癌(NPC)细胞作为研究对象〔4〕，以中国仓鼠卵巢细胞(CHO)、人肝脏细胞(L02)作为正常细胞对照，观察hLF在体外是否具有抑制癌细胞生长的作用，探讨hLF抗肿瘤的作用机制，从而为肿瘤的治疗提供研究基础，为临床实验及应用提供新的理论依据。
　　1 材料与方法
　　1.1 材料 人鼻咽癌细胞(CNE)、中国仓鼠卵巢细胞(CHO)、人肝脏细胞(L02)均购自中国科学院上海细胞资源中心。重组hLF(Lot:L0520，溶于PBS中，储存浓度5 mg/ml，-20℃储存备用)和噻唑蓝(MTT，Lot:M2128)均购自Sigma公司。RPMI1640、胎牛血清购自HyClone公司。其他试剂均为分析纯。
　　1.2 实验方法
　　1.2.1 细胞培养 各细胞系均应用含10%胎牛血清和1%青链霉素的RPMI1640培养基，5%CO2，37℃培养。
　　1.2.2 MTT法检测细胞增殖 设空白对照组和hLF干预组。待细胞生长至对数生长期，接种于96孔细胞培养板，接种数为5×104/孔。每组细胞设5个平行孔，各组细胞分别加入不同浓度的 hLF (0，1.25×10-3,2.5×10-3，5×10-3，10×10-3，20×10-3，40×10-3 g/L)，每孔均为200 μl。作用24 h后，加入MTT(5 g/L，每孔20 μl)，继续培养4 h，测定A570 nm吸光度。 （科教作文网http://zw.ΝsΕAc.Com编辑整理）
　　1.2.3 细胞形态观察 细胞经hLF处理后，倾去上层悬浮死细胞并用PBS洗两遍，加入新鲜培养基。同样处理对照孔细胞，将细胞置于倒置显微镜下，观察细胞形态的变化。
　　1.3 统计学处理 数据用x±s表示，组间比较用方差分析。
　　2 结 果
　　2.1 重组hLF对鼻咽癌细胞CNE、人肝脏细胞L02、中国仓鼠细胞CHO系的增殖能力的影响 对CNE呈现剂量依赖性的抑制作用，而对正常细胞无抑制作用，见表1。表1 人乳铁蛋白对各细胞体外增殖的影响与空白对照比较:1)P