黄芪与红芪的高效液相色谱鉴定论文(2)
2015-06-18 01:09
导读：2.2.4 精密度实验取黄芪甲苷对照品溶液，在1 d之内连续进样5次，20l/次，计算峰面积RSD为1.3%（n= 5）。 2.2.5 稳定性实验取所制备的黄芪样品溶液，分别在
2.2.4 精密度实验取黄芪甲苷对照品溶液，在1 d之内连续进样5次，20μl/次，计算峰面积RSD为1.3%（n= 5）。
2.2.5 稳定性实验取所制备的黄芪样品溶液，分别在0，3，6，12，18，24，36，48h测定黄芪甲苷的峰面积，计算黄芪甲苷峰面积的RSD为1.24%。结果表明，供试品溶液在48 h内稳定。
2.2.6 重复性实验精密称取同一批黄芪药材5份，各约4.0 g，制备供试品溶液，进样分析，测定相应的峰面积，计算黄芪甲苷平均质量分数为1.57 mg/g，RSD=1.26%（n= 5），表明方法的重复性良好。
2.2.7 回收率实验精密称定已测定的药材中粉6份，各约2.0g，分别精密加入黄芪甲苷3.0mg，按药材供试品溶液制备项下操作，计算回收率，平均回收率为98.0%，RSD为0.87%。
2.2.8 样品的测定分别取黄芪、红芪，按照“2.2.3”项下方法操作，得供试品溶液，分别精密吸取供试品溶液10μl，按照上述色谱条件分析测定，以外标两点法计算，样品的测定结果显示，黄芪药材中含有一定量的黄芪甲苷，而红芪中未见黄芪甲苷的成分。
3 讨论
黄芪为常用补气药，是我国重要的传统药材。《中国药典》规定，药用黄芪为豆科植物蒙古黄芪A stragalus membranaceus ( Fisch.) Bunge var lnong holicus (Bunge) Hsiao 及膜荚黄芪A. membranaceus (Fisch.) Bunge 的干燥根。黄芪中含有多种化学成分，如皂苷类、黄酮类、木脂素类、氨基酸类、多糖类及多种微量元素等［4］。研究表明黄芪甲苷具有降血压、镇静、镇痛及抗氧化等作用［5～7］，是黄芪的主要活性成分，因此黄芪甲苷常作为指标性成分应用于黄芪药材的质量监控。
目前黄芪甲苷的测定主要采用薄层扫描法，如2000年版《中国药典》收载黄芪药材中黄芪甲苷的测定方法即为TLCS 法，但其操作繁琐，重现性差。黄芪甲苷最大紫外吸收波长Kmax=20 018 nm，为末端吸收，不适于应用紫外吸收检测器测定。蒸发光散射检测器(ELSD) 作为HPLC法的一种检测器，对无紫外吸收的物质较为适用，因此， 参照高效液相色谱法(［1］) ， 经对比文献报道的黄芪甲苷测定方法，并经过反复优化，建立了黄芪甲苷的高效液相-蒸发光散射法测定方法。经过对线性范围、精密度、供试品溶液稳定性、重复性、回收率等方
法学考察，证明本方法操作简便、准确可行。采用HPLC法测定黄芪甲苷方法简便快捷，灵敏度高，可以准确地测定黄芪甲苷的含量。
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对黄芪甲苷进行测定时， 提取液以氨试液洗涤的量远高于未用氨试液处理， 据文献报道［8］，黄芪中有5种黄芪皂苷，它们的基本母核均为黄芪皂苷(黄芪甲苷)，这几种皂苷的糖链上连结有1～3个乙酰基，用碱处理时，乙酰基易脱落成为黄芪甲苷。因此经氨试液处理后的样品，所测得结果应该是黄芪总皂苷的量。通过高效液相色谱-蒸发光散射法对不同产地黄芪中黄芪甲苷的测定，对黄芪质量进行比较，得出如下结论: 不同产地黄芪中黄芪甲苷的量有一定差异。
黄芪甲苷(Astragaloside Ⅳ)是中药黄芪中的特征性成分，目前黄芪药材以及含黄芪的单方及复方中药制剂大多以黄芪甲苷为质量
评价指标，由于黄芪甲苷只在紫外末端有吸收，以往文献报道以薄层扫描方法居多，近年来，通过HPLC方法测定黄芪甲苷以其在准确性、重复性、灵敏度等方面的优势而逐渐为人们广泛使用。本研究采用HPLC法测定中药饮品黄芪与红芪中黄芪甲苷的含量，旨在鉴别已成药材中用红芪代替黄芪的伪品。HPLC分析速度快，方法比较简单，重复性好，是制剂质量控制的一种有力手段。饮片经炮制处理， 含水量较高， 含量偏低是否在加工中造成成分损失之故， 有待进一步探讨。
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