大孔吸附树脂纯化复方川芎方乙醇提取液的研究(2)

　　分别取一定量的D101型、HPD100型、AB8型大孔吸附树脂，用适量体积分数为95%乙醇浸泡24 h，使其充分溶胀。放出浸液，用体积分数为95%乙醇洗脱，至流出液与蒸馏水体积比为1∶2混合不产生混浊。改用蒸馏水洗脱至无醇味，放置，备用。

  　2.3 树脂含水量测定

　　通过测定树脂的含水量来计算单位干树脂的吸附量和解吸量。

　　称取已处理好的以上3种湿树脂2 g，平行3份，抽干水分，按照2005年版中国药典一部附录ⅨH水分测定法第一法(烘干法)进行测定，取平均值，结果D101型、HPD100型、AB8型大孔吸附树脂的含水量分别为75.04%、73.92%和73.04%。下载论文

　　2.4 静态吸附与解吸实验

　　精密称取经预处理后的3种型号湿大孔树脂各1 g，置50 mL锥形瓶中，加复方川芎方乙醇提取液(含生药量0.1 g·mL-1 )20 mL，超声提取1 h，静置24 h，使其达到饱和吸附，滤过，收集滤液。用蒸馏水洗涤树脂，洗涤液与滤液合并，定容至25 mL，测定吸附残液中阿魏酸的含量，分别计算吸附量S吸。将饱和吸附后的树脂滤除多余溶液，用4倍树脂体积的蒸馏水滤洗树脂，加入体积分数50%乙醇20 mL，超声振荡1 h，放置24 h。滤过，定容至25 mL,测定洗脱液中阿魏酸的含量，计算解吸量S解和解吸率S。见表1。

　　S吸=(C1V1-C2V2)/W

　　S解=C3V3/W

　　S=C3V3/S吸W

　　式中：C1为提取液质量浓度，μg·mL-1;C2为吸附残液质量浓度，μg·mL-1;C3为解吸液质量浓度，μg·mL-1 ;V1为提取液体积，mL;V2为吸附残液体积，mL;V3为解吸液体积，mL;W为树脂的干质量，g。表1 3种类型树脂吸附量、解吸量和解吸率的比较

　　使用大孔树脂进行纯化，不仅要求有较大的吸附能力，还需有较好的解吸能力。由表1可知，3种树脂对提取液中阿魏酸的吸附、解吸能力均为HPD100>AB8>D101，故选择HPD100型大孔吸附树脂。

　　2.5 上样量的考察

　　通过测定阿魏酸泄露曲线[2]，确定上样量。

　　取经预处理的HPD100树脂10 mL，湿法装柱，取提取液以2 BV·h-1的流速进行动态吸附， 每1 BV收集流出液1份，共收集17份，测定每份洗脱液中阿魏酸含量，并以上柱前提取液的含量计算每份洗脱液中阿魏酸的泄漏率(洗脱液中阿魏酸含量/上柱前提取液中阿魏酸含量)，以流出液倍床体积为横坐标，阿魏酸泄漏率为纵坐标，绘制阿魏酸泄露曲线，见图1。由图1可知，流出液为第7倍床体积便开始有阿魏酸被检测出来，因而上样量应控制在5.4∶7～5.5∶7(树脂∶原药材质量比)的范围内。

　　2.6 蒸馏水洗脱体积的考察

　　上样后，先用蒸馏水进行洗脱，可除去提取液中鞣质、蛋白质、多糖等杂质。但由于阿魏酸具有一定水溶性，洗脱时蒸馏水用量过大，会造成阿魏酸的损失，故需对蒸馏水洗脱体积进行考察。

　　按照上述吸附条件，提取液以2 BV·h-1的流速进行动态吸附，然后静态吸附过夜。次日用蒸馏水以4 BV·h-1的流速洗脱杂质，并分段收集流出液，每个树脂体积(湿体积)收集1份，共收集5份。测定各收集水洗流出液中阿魏酸的含量，见表2。表2 蒸馏水体积对阿魏酸量的影响结果显示，流出液为3倍床体积时阿魏酸损失率明显增加，故使用2 BV蒸馏水洗脱以去除杂质。

　　2.7 洗脱剂浓度的选择[3，4]